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兔子组织因子(TF)ELISA试剂盒

实验类型: ELISA
检测范围:
最低检测限:
应用范围: 免疫学检验

用途
该试剂盒用于体外定量检测血清、血浆或其他相关生物液体中浓度。
 
 
检测原理
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的抗原会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗体与结合在包被抗体上的抗原结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,抗原浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中指标的浓度。
 

反应类型 夹心法
规格 96T
反应时间 4.5h
反应性 通用
检测方法 Colormetric
灵敏度 检测下线除以10
样本体积 100μL
样本类型 血清、血浆或其他相关生物液体
特异性 可检测样本中的指标,且与其它相关蛋白无明显交叉反应
重复性 板内,板间变异系数均<10%
 
样品活化方法
生物样品中的通常以无活性的形式存在,在检测指标活性前必须进行活化处理。
活化方法如下:
血清、血浆: 280 μL标准品&样品稀释液中加入40 μL样品,混匀,加入40 μL活化试剂1,室温孵育10分钟。再加入40 μL活化试剂2,混匀后立即检测。
注意:样品被稀释了10倍!
细胞培养上清:20 μL标准品&样品稀释液中加入100 μL样品,混匀,加入40 μL活化试剂1,室温孵育10分钟。再加入40 μL活化试剂2,混匀后立即检测。
注意:样品被稀释了2倍!
组织匀浆:1960 μL标准品&样品稀释液中加入40 μL样品,混匀后检测。
注意:样品被稀释了50倍!
 
精密度
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
  批内变异系数 批间变异系数
样本 1 2 3 1 2 3
数量 20 20 20 20 20 20
平均值( MERGEFIELD 单位ng/mL) 0.41 1.07 4.96 0.47 1.25 4.24
标准差 0.02 0.05 0.22 0.03 0.06 0.2
变异系数 (%) 4.88 4.67 4.43 6.38 4.8 4.72
 
回收率
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
样本类型 回收率范围 (%) 平均回收率 (%)
血清(n=5) 94-110 102
血浆(EDTA)(n=5) 90-102 96
细胞上清(n=5) 95-106 98
 
线性
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
    血清(n=5) 血浆(EDTA)(n=5) 细胞上清(n=5)
1:2 回收率范围(%) 99-108 95-105 92-104
平均回收率(%) 105 102 97
1:4 回收率范围(%) 95-109 90-100 97-105
平均回收率(%) 102 96 100
1:8 回收率范围(%) 89-103 89-104 96-108
平均回收率(%) 97 97 102
1:16 回收率范围(%) 88-102 98-108 92-105
平均回收率(%) 94 104 100
 
试剂盒组成及保存
未拆封的试剂盒可在4℃保存一周;如果一周以后才使用试剂盒,请拆开试剂盒按照下表中的条件分别保存各组分。
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公司名称:  上海抚生实业有限公司
电话:021-52961052,021-52961053
传真:021-57690166
邮政编码:201100
地址:上海闵行区莘福路388弄莘东置业大厦1号楼807室
试剂盒组成 48孔配置 96孔配置
说明书 1份 1份
封板膜 2片 2片
密封袋 1个 1个
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主营产品:elisa试剂盒
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