土壤蔗糖酶(Solid-Sucrase, S-SC）试剂盒说明书
微量法 100管/48样
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
S-SC能够水解蔗糖变成相应的单糖而被机体吸收，其酶促作用产物与土壤中有机质、氮、磷含量，微生物数量及土壤呼吸强度密切关，是评价土壤肥力的重要指标。
测定原理：
S-SC催化蔗糖降解产生还原糖，进一步与3,5－二硝基水杨酸反应，生成棕红色氨基化合物，在510nm有特征光吸收，在一定范围内510nm光吸收增加速率与S-SC活性成正比。
自备用品：
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、甲苯（不允许快递）和蒸馏水。
试剂组成和配制：
试剂一：甲苯1mL×1瓶，4℃保存；（自备）
试剂二：液体7.5mL×1瓶，4℃保存；
试剂三：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前每瓶加入22mL蒸馏水充分溶解备用；用不完的试剂4℃保存；
试剂四：液体22mL×1瓶，4℃保存。
样品处理：
新鲜土样自然风干或37度烘箱风干，过30~50目筛。
测定步骤和加样表：
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试剂名称 |
测定管 |
对照管 |
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风干土样（g） |
0.03 |
0.03 |
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试剂一（μL） |
5 |
5 |
振荡混匀，使土样全部湿润，37℃水浴15min
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试剂二（μL） |
75 |
75 |
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试剂三（μL） |
220 |
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蒸馏水（μL） |
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220 |
充分混匀，放入37℃水浴培养24小时，10000 g，4℃，离心5min，取上清液
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上清液（μL） |
85 |
85 |
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试剂四（μL） |
215 |
215 |
充分混匀，95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失），流水冷却，蒸馏水稀释10倍（可以吸取100μL，加入900μL蒸馏水稀释；若吸光度大于4，可以加大稀释倍数），取200uL至微量石英比色皿或96孔板中510nm处读吸光值A。计算ΔA=A测定管-A对照管。每个测定管需设一个对照管。
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资料/datasheet
