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商品属性：
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产品名称 |
规格 |
货号 |
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Bst 2.0 DNA聚合酶(8U/ul) |
1600U |
A-PJ1001 |
描 述 ：
该 酶 来 源 于 Bacillus stearothermophilus DNAPolymerase I，通过基因工程手段去除了其 5’-3’外切酶活性，而保留了 5’-3’聚合酶活性。该酶具有很强的链置换能力，因此是 Isothermal amplification (LAMP, RT-LAMP)的绝佳用酶。与野生型 Bst DNA 聚合酶（大片段）相比，该酶在扩增速度、产量、耐盐性和热稳定性等方面均有大幅提高，同时，该酶可以使用 dUTP 作为底物进行扩增(Bst 大片段无此活性)。
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单位定义
一个活力单位即在 65°C 条件下，30 分钟内催化 10 nmoldNTP 的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量。
应用：
DNA 等温扩增
富含 GC 结构的快速测序
微量模板 DNA 的快速测序
失活：
85°C，5min 失活。
储存：-20℃可保存 3 年。
典型的 LAMP 反应
1. 按以下组分配制 LAMP 反应液
Bst 2.0 DNA Polymerase ( 8 U/μl) 0.25~1 μl
10×Isothermo Buffer(Mg2+ free) 2.5 μl
100 mM Mg2+
X μl
dNTP Mixture (10 mM each) 3.5 μl
模板 DNA 10 ng~1 μg
*10X Primers 2.5 μl
ddH2O Up to 25 μl
*10X Primers：16 μM FIP/BIP, 2 μM F3/B3, 4-8 μM LpF/B each。
2. 65°C 30~60min; 85°C 5min 失活。
使用注意事项：
(1) Mg2+的使用浓度为 4~10 mM 浓度，Isothermo Buffer中没有 Mg2+，通常情况下，在 6-8mM Mg2+条件下可获得较好的 LAMP 结果。
(2) 有文献报道加入 Tte Uvrd 解旋酶可改善 LAMP 的效果。
(3) 使用无模板 DNA 作为对照检测扩增的特异性。
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资料/datasheet
