尿酸（Uric Acid, UA）含量测定试剂盒说明书
微量法100T/96S
注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
UA是鸟类和爬行类动物的主要代谢产物，正常人体尿液中产物主要为尿素，含少量尿酸。此外，UA还是重要的抗氧化剂，能清除超氧化物，羟自由基等。体内UA生成量和排泄量不平衡会导致多种疾病的发生。例如，血中UA升高会引起痛风、肾功能损害和动脉硬化，相反UA降低会引起恶性贫血，在临床诊断上具有重要的意义。
测定原理：
尿酸酶能催化UA生成尿囊素，CO2及H2O2，H2O2 氧化亚铁氰化钾中的Fe2+ 生成Fe3+ ，Fe3+进一步与酚和4-氨基安替比林缩合生成红色醌类化合物，在505nm下有特征吸收峰，测定反应体系505nm的吸收值，可计算尿酸的含量。
自备实验用品及仪器：
恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。
试剂组成和配制：
缓冲液：液体20mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：
A：用于标准管和测定管，粉剂1瓶，4℃避光保存，使用前加13mL缓冲液溶解。
B：用于空白管，粉剂1瓶，4℃避光保存，使用前加7 mL缓冲液溶解。
试剂二：粉剂1管，4℃避光保存，使用前加2mL蒸馏水溶解，60℃加热溶解。
样品的制备：
测定操作表：
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标准管 |
空白管 |
测定管 |
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试剂一（μL） |
A, 60 |
B, 60 |
A, 60 |
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H2O（μL） |
180 |
240 |
180 |
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试剂二（μL） |
60 |
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样品（μL） |
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60 |
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混匀，37℃水浴30min，取200µL于微量石英比色皿/96孔板中，测定505nm处各管吸光值，标准管和空白管只需做一管。 |
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UV含量计算公式：
1. 组织：
（1）按样本重量计算
尿酸含量（μmol/g 鲜重）=C标准品×（A测定管－A空白管）÷（A标准管－A空白管）÷ （W÷V样总）=0.5×（A测定管－A空白管）÷（A标准管－A空白管）÷ W
（2）按样本蛋白浓度计算
尿酸含量（μmol/mg prot）=C标准品×（A测定管－A空白管）÷（A标准管－A空白管）÷ Cpr =0.5×（A测定管－A空白管）÷（A标准管－A空白管）÷Cpr
尿酸（μmol/L）= C标准品×（A测定管－A空白管）÷（A标准管－A空白管）×103
=500×（A测定管－A空白管）÷（A标准管－A空白管）
C标：标准品浓度0.5μmol/mL；V样总：加入提取液体积，1mL；W：样品质量，g ；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；103 ：1μmol/ L=103μmol/ mL
注意事项：
1. 血清样本请在24小时内测定，或者4℃密封避光保存不超过72小时。
2. 吸光值大于0.8可用蒸馏水稀释样本，并在计算公式中算入稀释倍数。
3. 最低检出限为10μmol/L。
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资料/datasheet
