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血锌浓度测试盒(比色法)
AS6321269
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AS6321269-100管/96样 100管/96样 ¥900.00 登录查看

血锌浓度检测试剂盒说明书

                                 微量法 100T/96S

注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义:

锌是必需的微量元素之一,在胰岛素和卟啉代谢中也起重要作用。

测定原理:

在pH 8.5~9.5的溶液中,Zn2+与锌试剂生成蓝色配位化合物,在620nm有最大吸收峰。

自备仪器和用品:

离心机、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、蒸馏水和无水乙醇。

试剂组成和配制:

试剂一:液体20mL×1瓶,4℃保存。

试剂二:液体15mL×1瓶,4℃保存。

试剂三:粉剂×1瓶,4℃保存。临用前1天配制,加入15mL无水乙醇充分溶解,盖紧,过夜待用。4℃保存可稳定约1个月,如颜色变黄,则已失效。

标准液:液体×1支,10 μ mol/L Zn2+标准液。4℃保存。

测定操作:

1. 分光光度计/酶标仪预热30 min,调节波长到620 nm,蒸馏水调零。

2. 标准液解冻:提前取出标准液,置于室温下充分解冻后混匀。

3. 空白管:取1.5 mL EP管,依次加入100 μL蒸馏水,100μL试剂一,混匀;室温,13000g,离心10min,小心吸取上清液100 μL,加入0.5 mL EP管,加入100μL试剂二,100μL试剂三,充分混匀后13000g离心取上清,吸取200μL于微量石英比色皿/96孔板,620 nm测定吸光度,记为A空白管。

4. 标准管:取1.5 mL EP管,依次加入100 μL标准液,100 μL试剂一,混匀;室温,13000g,离心10min,小心吸取上清液100 μL,加入0.5 mL EP管,加入100μL试剂二,100μL试剂三,充分混匀后13000g离心取上清,吸取200μL于微量石英比色皿/96孔板,620 nm测定吸光度,记为A标准管。

5. 测定管:取1.5 mL EP管,依次加入100 μL血清,200 μL试剂一,混匀;室温,8000g,离心10min,小心吸取上清液100 μL,加入0.5 mL EP管,加入100μL试剂二,100μL试剂三,充分混匀后13000g离心取上清,吸取200μL于微量石英比色皿/96孔板,620 nm测定吸光度,记为A测定管。

注意:空白管和标准管只需测定一次。

血锌浓度计算公式

血锌浓度(μ mol/ L)=C标准液×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)

= 10×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)

C标准液:10 μ mol/L Zn2+

注意事项:

  1. 试剂三需提前一天配制,如变黄色则不能再使用。
  2. 加入试剂三混匀后,要在30 min内完成该管测定。
  3. 最低检出限为1μ mol/L。

血锌浓度检测试剂盒配方(微量法 100T/96S)

试剂一:取20 mL试剂瓶,加入20mL甲醇。

试剂二:称0.2g氢氧化钠溶于50mL蒸馏水 充分溶解后取21.4mL于50mL试剂瓶中,

        取30mL试剂瓶,称0.32g硼酸、0.373g氯化钾溶于25mL蒸馏水,充分溶解后将其全部倒入上述21.4mL氢氧化钠溶液内混匀,取出15mL于15mL试剂瓶内,即为试剂二,其余的留着以后用。

试剂三:取10 mL棕色试剂瓶,加入12mg锌试剂

标准液:称取1 mg氧化锌(81.39MW),加10 μ L浓盐酸,10 μ L蒸馏水,充分溶解;加12.267 mL蒸馏水,混匀;取EP管,加入10 μ L上述溶液,加入990 μ L蒸馏水,混匀,即10 μ mol/L Zn2+标准液。

 

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