水土亚硝酸盐含量测定试剂盒说明书
微量法100T/96S
注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
亚硝酸盐广泛存在于水体和土壤中，不仅是有机氮分解的重要中间产物，也可能来自污染。人体摄入过量后，可诱发消化系统癌变。
测定原理：
在酸性条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸反应生成重氮化合物，再与N-1-萘基乙二胺形成紫红色偶氮化合物，在540nm处有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器：
天平、常温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、蒸馏水。
试剂组成和配制：
提取液：液体100mL×1瓶，室温保存。
试剂一：液体10mL×1瓶，4℃避光保存。
试剂二：液体10mL×1瓶，4℃避光保存。
样品处理：
测定步骤和操作表：
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测定管 |
空白管 |
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提取液（µL） |
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70 |
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样品（µL） |
70 |
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试剂一（µL） |
65 |
65 |
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试剂二（µL） |
65 |
65 |
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混匀，25℃静置15min，于微量石英比色皿/96孔板中检测540nm处吸光值A。 △A=A测定 - A空白 |
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注意：空白管只需测定一次。
亚硝酸盐含量计算：
标准曲线回归方程为：y=0.234x + 0.0002，R2= 0. 999 x为标准品亚硝酸钠浓度（μg/ml） y为吸光值A。
NO2-（μg/g）=（△A-0.0002）÷0.234×V样÷（V样÷V样总×W）×0.6668
=（A – 0.086）÷0.234×1.5×0.6668÷W
=4.27×（△A-0.0002）÷W
V样总：加入提取液体积，1.5 mL； V样：反应中样品体积，0.07mL；W：样品质量，g。
b.用96孔板测定的计算公式如下
标准曲线回归方程为：y=0.141x +0.095，R2= 0. 9991 x为标准品亚硝酸钠浓度（μg/ml） y为吸光值A。
NO2-（μg/g ）=（△A-0.0002）÷0.141×V样÷（V样÷V样总×W）×0.6668
=（△A-0.0002）÷0.141×1.5×0.6668÷W
=7.09×（△A-0.0002）÷W
V样总：加入提取液体积，1.5 mL； V样：反应中样品体积，0.07mL；W：样品质量，g。
注意事项：
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资料/datasheet
