土壤木质素过氧化物酶（Soil lignin peroxidase，S-Lip）试剂盒说明书
微量法100T/48S
注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义
木质素过氧化物酶（EC1.11.1.14）是一种含亚铁血红素的过氧化物酶，属于木质素降解酶系，在木质素生物降解、造纸工业、纺织工业、芳香化合物转化与降解及环境污染控制等方面具有较大的应用潜力。
测定原理
木质素过氧化物酶氧化藜芦醇生成藜芦醛，在310nm处有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器
天平、低温离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板（UV板）。
试剂组成和配制
试剂一：液体25mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体15mL×1瓶，4℃避光保存。
试剂三：液体10mL×1瓶，4℃保存。
样品处理
新鲜土样风干，过30-50目筛。
测定操作
|
|
对照管 |
测定管 |
|
土样（g） |
0.04 |
0.04 |
|
甲苯（μL） |
30 |
30 |
|
25℃静置15min |
||
|
试剂一（μL） |
|
200 |
|
蒸馏水（μL） |
200 |
|
|
试剂二（μL） |
120 |
120 |
|
试剂三（μL） |
80 |
80 |
|
30℃震荡反应3h，冰浴5min，12000g，4℃离心10min，取上清200μL，于微量石英比色皿/96孔板(UV)板，测定310nm处吸光值，分别记为A对照和A测定，△A=A测定- A对照 |
||
酶活计算公式
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
酶活性定义：每克土壤每天氧化1nmol藜芦醇所需的酶量为一个酶活力单位。
S-LiP活性（nmol/d /g 土样）= 
×V反总÷W÷T= 344×△A÷W
ε：藜芦醛摩尔消光系数：9300L/mol/cm；d：比色皿光径，1cm；V反总：反应总体积，0.4mL； W：样本质量，g；T：反应时间，3h
酶活性定义：每克土壤每天氧化1nmol藜芦醇所需的酶量为一个酶活力单位。
S-LiP活性（nmol/d /g 土样）= 
×V反总÷W÷T= 688×△A÷W
ε：藜芦醛摩尔消光系数：9300L/mol/cm；d：比色皿光径，0.5cm；V反总：反应总体积，0.4mL； W：样本质量，g；T：反应时间，3h
扫描二维码
扫描二维码
资料/datasheet
