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土壤有效硅测试盒(比色法)
AS6321335
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土壤有效硅试剂盒说明书

微量法100T/96S

注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义

硅元素是一种十分重要的植物营养元素,土壤中有效硅含量影响着植物的光合作用、呼吸作用以及对逆境的抗性。

测定原理

硅酸根与钼酸铵在弱酸条件下生成硅钼酸,可被还原剂还原成硅钼蓝,在700nm有特征吸收峰。

自备实验用品及仪器

天平、常温离心机、恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、震荡仪。

试剂组成和配制

提取液:液体105mL×1瓶,4℃保存。

试剂一:液体4mL×1瓶,4℃保存。

试剂二:液体4mL×1瓶,4℃保存。

试剂三:液体4mL×1瓶,4℃保存。

试剂四:粉剂×1瓶,4℃避光保存。临用前加入4mL试剂四溶剂充分溶解。

试剂四溶剂:液体4mL×1瓶,4℃保存。

样本处理

新鲜土样风干,过20目筛,按照土壤质量(g):提取液体积(mL)为1:5的比例(建议称取约0.2g土样,加入1mL提取液),振荡提取1h,10000g ,25℃离心10min,取上清液待测。

测定操作表

 

空白管

测定管

样本(μL)

 

40

提取液(μL)

40

 

试剂一(μL)

40

40

混匀,35℃,15min

试剂二(μL)

40

40

混匀,25℃,10min

试剂三(μL)

40

40

试剂四(μL)

40

40

充分混匀,25℃静置30min

于微量石英比色皿/96孔板,蒸馏水调零,测定700nm处吸光值A,分别记为A空白管和A测定管,△A=A测定管-A空白管

计算公式

  1. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准曲线:y = 0.0933x -0.0523,R2 = 0.9992

有效硅含量(mg/kg)=(△A+0.0523)÷ 0.0933×V反总÷(W×V样÷V样总)

                     = 53.6×(△A+0.0523)÷W

V反总:反应总体积,0.2mL;V样:反应体系中加入样本体积,0.04mL;V样总:加入提取液体积,1mL,W:样本质量,g

  1. 用96孔板测定的计算公式如下

标准曲线:y = 0.0467x -0.0523,R2 = 0.9992

有效硅含量(mg/kg)=(△A+0.0523)÷ 0.0467×V反总÷(W×V样÷V样总)

                     = 107.2×(△A+0.0523)÷W

V反总:反应总体积,0.2mL;V样:反应体系中加入样本体积,0.04mL;V样总:加入提取液体积,1mL,W:样本质量,g

 

 

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