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土壤有效硼测试盒(比色法)
AS6321337
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土壤有效硼试剂盒说明书

微量法100T/96S

注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义

土壤中有效直接影响着植物的吸收和利用。

测定原理

硼与甲亚胺在弱酸条件下形成棕黄色配合物,420nm有特征吸收峰。

自备实验用品及仪器

天平、常温离心机、震荡仪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板。

试剂组成和配制

试剂一:液体5mL×1支,4℃保存。

试剂二:粉剂×1瓶,4℃保存。临用前加8mL蒸馏水溶解,加0.125mL乙酸。

试剂三:粉剂×1瓶,4℃避光保存。临用前加4mL蒸馏水溶解。

样本处理

新鲜土样风干,过100目筛,按照土壤质量(g):蒸馏水体积(mL)为1:2的比例(建议称取约0.5g土样,加入1mL蒸馏水)加入蒸馏水,沸水中浸提10min,待自然冷却,加入50μL试剂一,震荡5min,8000g ,25℃离心10min,取上清液待测。

测定操作表

 

空白管

测定管

样本(μL)

 

40

试剂二(μL)

80

80

试剂三(μL)

40

40

H2O(μL)

80

40

充分混匀,25℃黑暗中静置1h

于微量石英比色皿/96孔板,蒸馏水调零,测定420nm处吸光值A,分别记为A空白管和A测定管,△A=A测定管-A空白管

计算公式

  1. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准曲线:y = 0.3897x - 0.021,R² = 0.9995

全硼含量(mg/kg)=(△A+0.021)÷ 0.3897÷(W÷V样总)

                 = 2.56×(△A+0.021)÷W

V样总:加入提取液体积,1mL,W:样本质量,g

  1. 用96孔板测定的计算公式如下

标准曲线:y = 0.1949x - 0.021,R² = 0.9995

有效硼含量(mg/kg)=(△A+0.021)÷ 0.1949÷(W÷V样总)

                 =5.13×(△A+0.021)÷W

V样总:加入提取液体积,1mL,W:样本质量,g

注意事项

  1. 配制好的试剂二4℃保存不可超过7天。
  2. 显色时严格控制温度并且避光,以免显色剂见光分解。
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