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发布日期:2025/12/23 9:22:00

血浆是通过在全血中添加抗凝剂防止凝固后分离得到的上清液。若采血后不及时处理,血液中的细胞代谢、凝血因子激活或物理震荡可能引起溶血、细胞破裂或目标分析物(如酶、细胞因子)降解,从而对后续检测(如ELISA、生化分析)造成严重干扰

关键处理步骤(避免干扰)

1立即混匀抗凝管

采血后必须立刻将采血管轻柔颠倒混匀510次,确保抗凝剂(如EDTA、肝素)均匀分布,防止血液凝固形成微小凝块。未充分混匀可能导致局部凝血,影响后续离心和检测准确性。

2尽快离心分离血浆

应在采血后30分钟内进行离心,最佳条件为28℃、1000×g离心15分钟,迅速分离上清液(血浆),减少血细胞与血浆接触时间。延迟处理会导致细胞代谢活跃,改变葡萄糖、乳酸等不稳定成分的浓度。

3控制温度与避光保存

若不能立即离心,应将样本置于4℃冷藏,但不得超过4小时。某些对温度敏感的项目(如儿茶酚胺)需全程冷链操作。

4避免溶血与反复冻融

操作中禁止剧烈震荡或使用过细针头抽吸,以防红细胞破裂释放内含酶类,干扰ELISA等检测系统。分离后的血浆若需长期保存,应分装至-80℃,避免反复冻融。

以下表格总结了血浆样本采血后关键处理措施及其防干扰机制:

处理步骤

操作要点

干扰风险

防范机制

抗凝混匀

采血后立即颠倒510

微小凝块形成

确保抗凝剂充分作用

快速离心

30分钟内,28℃,1000×g15分钟

细胞代谢导致分析物变化

缩短血细胞与血浆接触时间

温度控制

临时存放于4℃,不超过4h

成分降解(如乳酸↑、pH↓)

抑制细胞代谢活性

避免溶血

轻柔操作,不剧烈振荡

非特异性显色(如HRP干扰ELISA

防止血红蛋白释放

分装保存

-80℃分装冻存,避免反复冻融

蛋白质聚集、酶失活

减少物理损伤与变性

补充说明:对于特殊用途如cfDNA检测,推荐使用专用采血管(如Streck管),可在58℃稳定全血达72小时,但仍建议尽早分离血浆以保障质量。

为最大程度避免干扰,建议建立标准化操作流程(SOP),包括使用正确的抗凝管类型(如EDTA管用于多数分子检测)、严格控制离心时间和温度,并做好样本标记与分装记录。

 

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