身为全球生物研究范畴里的标准品,ATCC细胞,其来源具备的可靠性,同实验数据的准确性以及可重复性,有着直接的关联。在一线科研人员这里,怎样从诸多渠道当中,辨别并且获取达到标准的细胞株,是一个必须谨慎处理的环节。这不但属于实验启动的首个步骤,更是后续全部研究工作的根基。
如何验证细胞身份
在成功获得ATCC细胞之后,首要的任务并不是直接着手开展实验,而是要去进行身份方面的验证,短串联重复序列这种分析方式,是当下国际所公认的“金标准”方法,借助把细胞的STR图谱与ATCC官方数据库加以比对,能够精准地确认细胞株的身份,切实有效地排除掉在实验过程中极有可能会出现的交叉污染或者是错误标记,请记住建议在细胞复苏传代之后,马上进行取样然后送去检验,以此来保证后续实验数据的起点绝对准确无误。
怎样确保复苏成功率
取出于液氮或者干冰当中的冻存管,其复苏的过程是所要严格把控着的。而最为关键的一步是在于“快”,也就是要迅速地让冻存管处于37℃恒温水浴里头不停地轻轻摇动着,一定要在1至2分钟区间里头完成这一回的解冻操办流程而减少冰晶对于细胞膜所造成的损伤危害。复苏之后的细胞应当马上转移到预先已经调控好了温度及二氧化碳浓度数值的这一种完全培养基里头去,经由低速进行离心操作来去除掉冻存液里面所包含着的保护剂二甲基亚砜(DMSO),这一步骤对于维持细胞处于高位生存活性几率来说是相当重要的。
何时需要重新购买
细胞传代到一定代数之后,好多实验室会察觉到,其形态、增殖速度或者标志物表达出现明显漂移。等到细胞形态变得不规整,贴壁能力降低,对常规消化酶的敏感性产生变化,又或者在关键实验里面一直没法重现以往数据的时候,那就应当考虑重新引入ATCC细胞。正常情况下,建议对细胞使用代数严格把控在20代以内,从源头上确保实验体系的稳定性和一致性。
当下,生命科学领域之中,对于实验可重复性的要求,越发严格起来,在此种背景状况之下,您所在的实验室,一般而言,会把细胞株的使用代数,控制在多少代以内,以此来确保数据质量呢?






