首次从生物体组织分离后进行培养的那批细胞群体，也就是原代细胞，于生命科学基础研究以及药物筛选等领域里占据着不可被替代的位置。跟永生化细胞系不一样，原代细胞最大程度地留存了来源组织的生理特点与遗传讯息，进而能更真切地展现出体内的细胞状况。然而，这同样表明它们对于环境变化格外敏感，操作期间的任何一点疏忽都极有可能致使实验失败 ， 成为泡影。

为什么原代细胞总是养不活

这差不多是每一个头一回接触原代细胞的研究者都将会碰到的难题，原代细胞对生长环境特别挑，培养基的配方、血清的批次，就连培养皿的表面处理都会明显影响其贴壁以及增殖能力，更关键的是，分离过程里的酶消化时间与力度要是把握不好，会直接损害细胞膜，致使大量细胞在接种之后24小时内死掉，细胞来源个体的年龄、健康状况以及取样之后的处理时效性，都是决定细胞活性的关键因素。

原代细胞和细胞系到底怎么选

这得看你做实验的目的是啥。要是研究的目标是去探究药物在跟真实生理环境比较接近的情况下细胞的反应，那原代细胞绝对是更好的选择，为啥呢，因为它们把来源组织的信号通路还有代谢特征给保留下来了。不过细胞系有均一性比较好、增殖能力很强、实验的可重复性比较高这样的优点。要是你的实验需要长时间进行观察或者大规模地去筛选，那细胞系更合适；而要是涉及个体差异以及组织特异性功能的研究，那就必须得选原代细胞。

实验前必须确认的三个关键

查证细胞来源的合法性以及检测报告，从而保证不存在细菌、真菌还有支原体污染。其次，预先备好全部培养基以及添加剂，鉴于原代细胞对饥饿以及温度变化特别敏感，在操作之前需把培养基放进培养箱中预平衡最少1小时。再者，算清楚所需细胞数量，由于原代细胞传代次数受限，一般仅能传3至5代，实验方案得依据这一特性予以优化，防止因细胞老化致使实验中断。

在着手开展原代细胞实验之前，你有没有针对那些有可能出现的难题，做好了充足的应对预案呢？