在生命科学范畴里的基础技术是细胞培养，其重点是模拟体内的环境，以使细胞在体外持续保持生长以及增殖，把控规范的操作流程还有关键的控制点在于能够得到可靠实验结果的保障，本文会依据设备准备、污染防控以及培养基选择这三个方面，对实际操作之中的注意事项去进行梳理。

细胞培养需要哪些基本设备

操作细胞培养工作时，超净工作台属于核心操作区域，它可提供局部百级洁净环境。二氧化碳培养箱起到维持恒定温度、湿度以及5%二氧化碳浓度的作用，这是多数哺乳动物细胞生长所需的必要条件。倒置显微镜利于每天对细胞形态和生长密度加以观察，而离心机、移液器和细胞计数板是传代与冻存操作里不可缺少的工具之一。所有设备都要定时校准和维护，以此保证参数稳定。

如何避免细胞培养中的污染问题

细胞培养最常见致使失败的原因是污染，污染其性质主要划分成细菌污染、真菌污染以及支原体污染这几种类型。在进行操作以前，应当开启超净台的紫外灯去照射30分钟时长，并且要使用75%浓度的酒精来擦拭相关台面。所有会接触到细胞的那些耗材都必然得经过灭菌处理才行，试剂则需要分开来进行使用，目的是避免出现反复去打开盖子的情况。操作的时候动作务必应当做到轻柔状态，移液管绝对不可以去触碰瓶口的外侧部分，与此同时建议在培养基里面添加双抗以此作为预防方面的措施。一旦察觉到培养液呈现浑浊或者pH出现异常状况，就应该马上展开隔离并且查找到污染源。

细胞培养基怎么选更合适

细胞类型决定选择培养基，DMEM适用于多种贴壁细胞，像成纤维细胞，RPMI - 1640常用于悬浮生长的淋巴细胞，血清浓度通常为5%至20%，胎牛血清因营养全面被广泛使用，还需注意补充谷氨酰胺和丙酮酸钠等成分，部分细胞需要添加生长因子，建议查阅细胞供应商的说明书，或参考相关文献中的成熟配方，首次培养时可先做小规模测试。

细胞培养的日常观察要点

每日都要在显微镜之下对细胞状态予以检查，留意其形态是不是规则，贴壁是不是牢固，还有胞质有没有颗粒。正常生长着的细胞折光性很强，分裂相十分明显；要是出现了空泡，变圆，或者脱落的情况，这意味着没准存在问题。与此同时还要记录培养基颜色的变化，酚红指示剂从红变为黄说明pH降低了，需要及时更换培养液。培养密度达到80%到90%的时候应当开展传代，太过密集会致使接触抑制甚至细胞老化。