就用型的PCR试剂盒是将聚合酶、dNTP、缓冲液等这些组分预先混合好了的，拿到手之后直接添加模板以及引物就能够上机。跟传统的分装方式相比较而言，它可是省去了反复进行配液以及移液的步骤，特别适合日常的基因扩增实验。下面从三个实际进行使用的角度来谈谈它具备的优势以及需要注意的要点。

即用型PCR试剂盒如何减少污染

分装试剂之际，每当开启一回管盖，便会增添一次气溶胶污染的风险。用于即时使用方面的PCR试剂盒，把所有的组分封闭于同一管之内，你也仅仅只需加入模板以及引物，使得开盖的次数由四五次降低成一两次。众多的产品还采用带有滤芯的吸头以及独立的小包装这种方式，从而进一步阻断交叉污染。针对于痕量模板的检测，这样的设计能够显著地提升结果的可靠性。

在实际开展的实验里头，污染常常源自操作所处的环境，并非试剂自身。那种即用型的产品，削减了人工进行配液的环节，如此一来，也就降低了枪头多次插入试剂瓶的可能性。与专用的洁净区域以及加样流程相互配合，假阳性率能够被压低到相当低的程度。要是你频繁遭遇非特异性条带的情况，不妨先尝试去换用预混型的试剂。

即用型PCR试剂盒稳定性怎么样

让人最为担忧的是预混试剂在长期保存的情况下，酶活是否会出现下降的情况。优质的即用型产品运用冻干或者特殊缓冲液体系，于-20℃的环境当中能够稳定存放超过12个月。部分产品甚至还支持在4℃的条件下进行短期保存一周，即便经过3至5次的反复冻融，扩增效率依旧能够维持在90%以上。在出厂之前每一个批次都会开展加速老化测试，以此确保在运输以及存储过程中的性能保持一致。

使用之前，要留意观察试剂的颜色以及沉淀状况。正常的即用型 PCR 试剂盒应当是澄清的或者稍微带有乳光的液体，要是出现絮状物体亦或是颜色变黄，那就表明可能已经产生降解。另外，分装以后要尽快把它放回低温环境之中，防止在室温的情况下超过 30 分钟。依照这些习惯去操作，你基本不会担忧稳定性出现问题。

即用型PCR试剂盒使用注意点

即使省掉了配液步骤，然而模板质量以及引物设计依旧决定着成败，即使用型试剂于模板纯度要求较为低些，能够容忍一定数量的蛋白质或者盐离子干扰，可是过度降解的DNA仍然会致使扩增失败，提议每次实验设定阳性对照以及阴性对照，以便于快速定位问题究竟是出在试剂方面还是样本方面。

不同品牌的、那种即可以直接使用的PCR试剂盒，其镁离子浓度以及热启动机制方面的差异是比较大的。当首次去使用某一款产品的时候，最好是依照说明书所推荐的退火温度以及循环参数，先去做梯度测试。有一部分产品是需要对热启动酶进行预激活的，5分钟95℃这样的加热步骤是不能够省略掉的。另外，当扩增片段超过3kb的时候，普通的、那种即可以直接使用的试剂可能会显得力不从心，此时应去选择专门的长片段版本。