在生命科学基础研究里,会被用到、不可或缺的工具是肿瘤细胞株,它被用来探索细胞生长、信号转导以及药物筛选等机制。正确地选择并使用细胞株会直接去影响实验数据的可靠性以及可重复性,这需要从来源、培养条件以及身份鉴定等多个维度进行严格把控。
肿瘤细胞株培养条件
不同种类的肿瘤细胞株,对于培养基,血清浓度以及气相环境,有着特定的要求。贴壁细胞跟悬浮细胞的培养方式差别很显著,比如说,有一些细胞株,需要添加非必需氨基酸,或者丙酮酸钠。培养之前,一定要查阅原始文献,或者细胞库说明,以此来确认最佳的培养参数,防止因为环境不合适,造成细胞状态不正常或者表型发生漂移。
肿瘤细胞株鉴定方法
拿到了新的细胞株之后,首先要去进行形态学方面的观察,以及生长曲线的测定,不过最为可靠的鉴定方式却是短串联重复序列也就是STR分析。定期地开展支原体检测同样是必要的环节,因为支原体一旦污染就会改变细胞代谢以及基因表达的特征。建议每隔2到3个月就重复进行一次鉴定,以此来确保在实验过程当中细胞的身份并没有发生交叉污染。
肿瘤细胞株污染处理
一旦发觉真菌或者细菌污染,就应当马上隔离并且废弃遭受污染的细胞,要彻底消毒培养箱以及工作台面。针对于支原体污染,能够使用专用清除试剂进行处理,不过处理完毕之后需要重新检测来确认。在日常操作当中要严格执行无菌技术,不同细胞株要使用独立的培养瓶以及移液管,以此来避免交叉污染的风险。
肿瘤细胞株传代技巧
细胞传代之际,若消化时间延续过长,或者吹打力度过猛,均会致使细胞膜受体遭受损伤,进而对后续实验产生影响。建议依据细胞密度来调整传代比例,通常1:3至1:6是较为常用的。需记录每一株细胞的代次,当超过30代之后,应当复苏早期冻存的批次,这是由于长期进行培养,有可能引发遗传变异以及功能改变。






