于分子生物学实验里头，时间常常是决定是否成功的关键要素。快速PCR扩增试剂盒恰恰是为处理传统PCR耗费时间太久的问题而规划，它借由优化的酶体系以及缓冲液配方，把原本两三个小时的扩增流程压缩到半小时左右，极大地提高实验效率。

PCR快速扩增原理

快速PCR试剂盒的关键部分是热启动酶以及特殊添加剂共同发挥的作用，传统Taq酶要有较长的激活时间，还得有延伸步骤，快速试剂盒用的是改造后的聚合酶，在预变性之后可以很快达到最好的活性状态，与此同时，缓冲液里的促溶剂与稳定剂能够把变性退火环节的保持时间缩短，让每个循环从数分钟变为十几秒。

如何选快速PCR试剂盒

进行选购之时，需要着重去关注扩增速度以及产物特异性这两个指标。对于不同品牌的快速试剂盒而言，其对模板浓度以及引物设计的要求是存在着差异的，建议先去查看产品说明书当中的推荐参数，此后再结合自身的实验样本开展小规模测试。另外，试剂盒是不是附带独立的染料或者增强剂也是值得去留意的。

操作要点解析

采用快速试剂盒之际，退火温度精准设定极为关键，因循环时间大幅缩短，温度变化对引物结合的影响被放大，故建议先借由梯度PCR确定最佳退火温度且，模板投入量不宜过高，一般50微升体系里加入10到50纳克基因组DNA便可满足多数扩增需求。

倘若出现并非特异性的条带或者弥散拖尾的情况，那么可以试着把退火的温度提升1到2度，且核查预变性的时间是不是足够。针对于GC含量比较高的模板而言，推荐去选择附带GC缓冲液的快速试剂盒版本。除此之外，每一次的实验都应该设置阴性对照，以此来排除因为气溶胶污染所导致的假阳性结果。