ELISA检测试剂盒，是实验室常用工具，其原理是基于抗原抗体特异性反应，借助酶催化底物显色来进行定量或者定性分析。在实际操作当中，从试剂盒选择开始，一直到结果判读为止，每一个步骤都直接对数据可靠性产生影响。
怎么选ELISA检测试剂盒
面对着诸多的品牌以及规格，首要的是要清晰地明确检测样本的类型以及靶标分子，不同的试剂盒针对血清、细胞上清或者组织匀浆的兼容性存在着显著的差异，需要去核对说明书之中的验证数据，其次要关注灵敏度以及检测范围，要保证目标浓度处于标准曲线的中间区域，防止边缘效应所带来的误差。
ELISA实验操作关键步骤
加样的时候要使用校准过的移液器，而且得垂直悬空着加到孔底，务必避免出现气泡或者溅射现象。洗板的操作会决定背景噪音的高低，推荐运用自动洗板机并且调整吸液头的位置，每一个孔浸泡的时间至少要有30秒。孵育阶段要严格把控温度，用封板膜防止液体蒸发，振荡速度建议设置在的500-600rpm这个范围，以此来保证反应的均匀性。
常见问题与解决方法
因其洗板不充分或者封闭液过了保质期，所以导致了高背景值，此时能够加大洗液吐纳的次数，并且去更换新鲜的封闭液。标准曲线线性差常常是由于倍比稀释误差所引发而来的，故而建议使用多道移液器，同时逐孔进行混匀工作。显色过分深或者过分浅的情况，需要去核查底物保存方面的条件，防止出现反复冻融的现象，必要之时重新配制终止液。
如何保证结果重复性
每次进行的实验批次，都一定要设置复孔以及质控品，计算得出的变异系数应当是小于百分之十五的。试剂盒的各个组分，需要按照说明书的要求，进行分装保存，以此来避免因为反复打开盖子而引入污染物。在实验结束之后，要及时去读取吸光度，要是延迟进行检测，就需要在避光的条件下，保存于四摄氏度。要记录下所有的操作参数，方便后续进行溯源以及优化。
