染料法qPCR试剂盒在基因表达定量分析里属于极为常用的工具当中的一个，它依靠荧光染料跟双链DNA相结合以此适时监测扩增产物。对于平常进行基因表达、基因分型或者病毒检测的实验室而言，挑选对一个可靠的试剂盒直接关联到数据准确性与实验重复性。

灵敏度够不够用

最低模板量能被检测到与否取决于灵敏度，染料法依靠SYBR Green等染料和DNA相结合，低拷贝数目标易被背景信号淹没，要是试剂盒的灵敏度不够的话，实践里建议先用标准品做梯度稀释测试，看看试剂盒在10个拷贝以下能不能给出清晰的扩增曲线，很多试剂盒说灵敏度高，但其实际表现得看信噪比以及Ct值的线性范围。

特异性如何保证

有着无法区分特异性产物与非特异性产物的染料法，会检测到引物二聚体。所以，试剂盒的缓冲体系得能够抑制非特异性扩增。优秀的试剂盒会增添热启动酶以及优化Mg2+浓度，致使引物于低温时不能延伸。实施熔解曲线分析之际，单峰象征特异性良好，要是出现杂峰或者宽峰，表明试剂盒需升级或者引物设计存在问题。

重复性好不好

实验重复性差常常是因为试剂一致性欠佳，或者抗干扰能力不强。不同批次的试剂盒，要是成分活性波动大，那么Ct值的批间差异就会超出0.5个循环。另外，样本里可能残留乙醇、苯酚等抑制剂，耐抑制性强的试剂盒方可保持扩增效率稳定。选购的时候要求厂家给出多批次测试数据，或者自己用复杂样本（像土壤DNA、血液DNA）来做比对。

操作便捷性高吗

染料法qPCR试剂盒不少是采用预混液形式的，可是预混液里头是不是涵盖了所有必需的组分，也就是酶、缓冲液、dNTPs、染料，这直接对加样步骤产生影响。全能型预混液只要加入引物、模板以及水就行，出错的概率更低。另外还要留意是不是适合快速程序，有些试剂盒能够把退火延伸合并成一步，进而将总体的时间从2小时压缩至40分钟。挑选跟自身qPCR仪器相兼容的ROX参比染料类型也是相当关键的。