我的朋友老张,干了八年生化检测
我认识了十几年的老张,是我的老朋友,他在一家第三方检测机构担任技术主管。
在食品、环境、农残这些领域进行生化指标分析的工作由他所在的公司负责,他带领着一个由八人构成的检测小组。
在去年接近年末的时候,我们一同进行了吃饭这个行为,他满脸愁容,以一种苦恼的神情跟我讲,在最近这段时期,项目所带来的压力处于紧凑的状态,样品的数量变为了先前的两倍,可是检测的速度却没办法跟得上。
老张讲,他们始终采用的是手工比色法,针对每个样品而言,都需要单独去添加试剂,还要经过孵育的过程,之后进行比色,在一天的时间里,最多能够完成两百个测试。
客户催得急,加班加点是常事,关键是人累了还容易出错。
为什么手工比色法越来越吃力
老张为我计算了一笔账目:一个完备的生化检测流程,从对样品进行处理开始,接着是添加样本,随后加入试剂,之后进行混匀操作,跟着予以孵育处理,再开展比色步骤,最终到将数据记录下来,每个环节均依靠人工。
碰见数量众多的样品,像是上个月承接了一个关于水源地普查的项目,有三百多个水样要对硝酸盐以及磷酸盐进行检测。
倘若采用手工制作的方式,那么其中一个参数就需要配置三百多个比色管,要逐个进行加样操作,还要逐个开展比色工作,并且在这中间还得对比色皿进行清洗。
那天老张讲,在那段日子,他们那个小组,接连不断地加了十天班,可是到了最后,数据居然还没有弄出来,这时候客户就已经开始催促报告了唉。
更为麻烦的是,人工进行操作存在重复性方面的不稳定情况。针对同一个样品,不同的人所做出的吸光度,其差值能够达到百分之五至百分之八。
老张他自己也是颇为烦恼,手下那些新人要培训足足三个月才能够独自开始上手工作,并且只要一到加样这个环节就特别容易出现手抖的状况。
遇见微板法生化检测,像是打开了新大门
今年三月上旬,老张前往广州,参与一场检测技术交流会议,于展台上瞅见一台酶标仪。
与之相邻的工作人员向他展示了微板法生化检测的整个流程,先是在九十六孔板里进行一次加样操作,然后同时对几十个样品展开处理。
老张当时就来了兴趣,详细问了原理和操作步骤。
回去到公司之后,他着手去查资料,而后开展做对比试验。他针对手上一个平常会用到的水质总磷检测项目,将其从手工比色法转换为微板法。
老张对我讲,微板法的关键所在是拿微孔板去替换比色皿,每一个孔都是一个独自的反应单元。
加样之际会用到多通道移液器,一次针对八孔实施或针对十二孔进行,在不到两分钟的时长内,便能够完成一块包含九十六孔的板子的加样操作。
在孵育这个步骤之时,是将那完整的一块板放置进恒温箱里面,而比色的时候呢,则是直接运用酶标仪进行扫描,仅仅经过十几秒钟就能够读取完所有孔里面的数据了。
老张开展了对比试验,手工比色法要做九十六个样品,从开始加样一直到得出结果,两个人相互配合的情况下,所需时间是四个半小时。
微板法生化检测,使用同样的样品量,由一个人来操作,从加样开始,一直到读数结束,仅仅需要一个半小时。
微板法生化检测到底能解决哪些问题
公司内部,老张做了一回汇报,将微板法的优势归结为了几个核心要点。
微板法生化检测速度快在哪里
有一块九十六孔状的板,它能够同时对九十六个样本进行处理。要是开展双复孔的操作,同样能够一次对四十八个样本予以检测。
在加样操作时采用多通道移液器并搭配排枪,其加样效率相较于仅使用单通道移液器,提升幅度达到了八至十二倍之多,是这样的情况。
酶标仪读板时其显现出的速度更为迅速,针对九十六个孔逐一全都读取一遍所需的时间不到二十秒,并且数据能够自动被录入至电脑当中。
微板法生化检测怎么保证准确性
老张起初担忧微孔板各孔之间存在均一性方面的问题,为此他特意开展了验证实验。
他把同一样品,装满了九十六个孔,之后对其测了吸光度,接着计算了变异系数,最终得到的结果是百分之二点三,这个结果完全符合标准的要求。
就微板法而言,其加样的体积是比较小的,而标准曲线所用到的试剂剂量,仅仅是手工法的五分之一,如此一来,试剂批间差所产生的影响,便是变小。
并且,酶标仪的光路属于垂直光路,每一个孔的检测光程保持一致,如此一来,便避免了比色皿光程差所产生的系统误差。
微板法生化检测对操作人员友好在哪里
老张手下存在一个小李,平常在进行加样的操作期间手部不太稳当,从事手工比色工作之际常常会将试剂洒落在比色皿的外壁。
改成使用微板法之后,加样只需朝着对准的孔位垂直打出,并非像比色皿那般在侧壁进行打液,操作的难度显著降低了。
少了多通道移液器使用时重复移液所带来的疲劳感,老张讲现下小组里没人再喊手腕酸了。
转型过程中遇到的问题和解决办法
老张作出决定,要在部门范围之内,全面去推行微板法生化检测,然而,这个过程并非是一路顺畅的,是存在波折的。
第一个阻力源自老员工,有一位已工作足足十年的老师傅讲,他运用手工比色法从未出现过差错,故而不愿去学习新方法。
老张并未进行强求,而是促使,让老师傅运用手工法并且采用微板法,同时去制作一批盲样,使得他能够自行对比结果,以及自行考量耗时。
老师傅结束操作之后,察觉到那种运用微板法所获取的结果和他运用手工法得出的结论相一致,然而其速度方面却加快了差不多三倍之多。随后,他积极主动地前来向老张请教操作方法。
其一,第二个问题所涉及的是配套耗材,其二,微板法予以使用的九十六孔板具有一次性特质,其三,于此状况对应的比色皿存在可以反复进行使用的特性。
老张计算了成本,一块板子大约十来块钱,然而节省下来的人工费以及试剂费,综合进行计算后,每个样品反倒便宜了两毛钱。
他把成本对比表发给老板,老板当场就批了微板法改造的预算。
从检测标准方面来看,第三个问题涉及到方法有关的验证,在一些检测标准当中,所写的是比色皿法,若要直接将其换成微板法,那么就需要针对此进行方法确认。
老张花费了两周时长,针对手头的十二个常规项目一次又一次、挨个逐个地开展了微板法跟手工法之间的两者进行对比的行为。
他对每个项目的线性范围进行了记录,对每个项目的检出限进行了记录,对每个项目的精密度进行了记录,并对每个项目的准确度进行了记录,之后整理出了厚厚一本验证报告。
这些报告后来成了公司扩项的参考材料。
四月份的一个真实案例
四月中旬的时候,老张所在的公司接到了一项紧急任务,这任务是对某工业园区周边农田的土壤速效养分进行检测,一共有五百四十个样品。
有客户提出需求,要求在五个工作日的时间范围之内,给出全氮、有效磷、速效钾这三个参数的相关数据。
要是采用手工比色那种方式,五百四十个样品,再乘上三个参数,总共会有一千六百二十个测试。
根据先前的速度,两个人一日完成两百个测试,所需时长为八个多工作日,且此时间未将数据处理时间计算在内。
老张开了板,采用微板法进行生化检测,他将九十六孔板划分成了三组,每一组都去做不一样的参数。
每隔一块板制作出来九十六个样品,再额外添加上标准曲线以及质控样,最终实际有效的样品孔数量为九十个。
样品有五百四十个 ,参数存在三个 ,总共所需板数是十八块。每块板从开始加样直至读数结束 ,计量时间为一小时?
两个人一块儿进行操作,一个上午能够完成六块板,到第三天下午的时候,所有的数据都呈现出来了。
老张讲,工作量相同的情况下,要是换成手工方式,起码得需要三个星期才行。微板法使得他们提前两天就交上了报告,客户对此极为满意。
微板法生化检测的适用场景不只土壤
老张后来又把微板法用到了更多的检测领域。
以前,食品里的还原糖测定,采用的是斐林试剂滴定法,针对一个个样品,要进行三次滴定,而后再去求取平均值,如此一来,所耗费的时间比较长,并且易于出现看错终点这种情况。
变换成微板法之后,老张借助DNS试剂来进行显色,九十六孔板一回测定三十二个样品,每个样品存在三个重复,其结果呈现稳定状态。
对环境水样进行化学需氧量测定时,用到了微板法,此方法配合密闭消解,于一块板上,同时开展标准曲线制作以及样品测定工作 线性相关系数能够达到零点九九九及以上。
关于生物发酵液的酶活力检测,老张采用微板法去做动力学测定这项工作,酶标仪具备能够设置连续读数的功能,每隔三十秒钟就会读取一次数据,最终可以直接获取反应曲线。
刚开始接触微板法生化检测需要注意什么
老张说,新手容易犯几个错误,他总结了一下。
加样的顺序得保持一致,微孔板上面的孔个数众多,要是加样的顺序出现混乱,就极易把样品的对应关系给弄混淆。
老张所采用的途径是,每当增添一排之时,便会于纸张上面打上一个勾,又或者借助板贴去记载加样的顺序。
要防止孔间出现交叉污染,对于多通道移液器而言,其枪头需要定期去进行更换,在不同浓度的标准品相互之间,必须更换枪头。
孵育条件得要求严格,微板法当中,每个孔的液量是少的,蒸发现象相较于比色皿更为明显,边缘的孔是更容易受到影响的。
老张所采取的做法为,给用不着的边缘孔里添加纯水亦或是缓冲液,目的在于致使边缘效应得以减少。
酶标仪在使用之前是需要去做空白校准的。每一次开机之后,老张都会采用纯水来做一回全板空白读数,以此来确保光路处于正常状态。
微板法生化检测让老张的工作效率翻倍
当前,老张所在的部门,已将十几个常规的项目,统统转变为微板法生化检测。
他做过统计,人员相同,工作时间一样,检测通量提升至三到五倍,试剂成本降低百分之三十到四十。
更是关键所在的是,数据的可重现状况得以改善了。在上个月所开展的能力验证过程中,他们以微板法申报了六个参数,并且全部都是一次性就顺利通过了。
老张面带笑容地讲着;往昔最怕的是客户突然提出加急的订单;不过如今不论送来多少样品;他都丝毫不惧怕了;只需多准备几块板便可以了。
上周末,我们再度一同进餐,老张讲,他正思索着将微板法运用至更众多的检测项目里,并且还打算尝试去开展自动化加样。
他讲,这个方向没错,检测领域早晚得从人工操作转型升级至半自动化以及全自动化。
微板法,是中间极为实用的一步,无需投入几十万的自动化设备,仅靠几千块钱的排枪,再加上一块板子,就能将效率提升上去。
要是你同样进行生化检测,碰到批量样品做不完,还得加班加点处于那种困境,不妨去尝试一下微板法。
一块板子,一把排枪,一台酶标仪,也许就是你要找的突破口。






