上个月,老张身处实验室,对着显微镜持续看,看了足足三个小时,最终才长舒一口气。他是我知晓十年的老朋友,于一家生物技术公司司职细胞培养,已然干了将近八年,按常理讲早就该得心应手了。然而去年那场“细胞株事故”,差点致使他丢失掉整个实验批次的进度。
老张所主要负责的,乃是肿瘤药物筛选工作处于前期阶段的事务,简单来讲,便是要将细胞株培育好,确保每一批次细胞具备稳定性以及一致性,然后才能够使得后续的测试数据拥有说服力。以往呢,他所使用的皆是公司祖传下来的那几株细胞株,在传代几十次之后,结果变得愈发不稳定起来。去年六月,他于一次关键的药效测试当中发现,半数抑制浓度竟然比之前差了差不多一个数量级。
那时老张觉得是操作方面出现了状况,重新配制了培养基,更换了一批血清,就连培养箱的温度探头都进行了一遍校准,如此折腾了足足两周时间,然而结果却依旧是原来那般模样。他心里明白,问题是出在细胞株自身这个点上,也就是传代的次数太多了,致使部分细胞已发生了基因漂变。
他尝试着于网络之上搜寻“细胞株代次对实验结果的影响”,瞅见好多同行也碰到相似情形。有人给出缩短使用周期的提议,有人举荐重新从原代库复苏,另外有人提及了运用经过严格质控的标准化细胞株资源。老张一番查询才发觉,原来在国内已然存在几家机构在进行细胞株的保藏以及供应,像中科院细胞库这般,并且还有一些第三方检测平台能够提供细胞株的STR鉴定服务。
去年九月,老张狠下心,经由正规途径引进了一株全新的细胞株,与此同时,他给自家的旧细胞株做了STR鉴定。结果显现后,连他自己都猛地一惊,旧细胞株的基因图谱跟标准库里的参考图谱于三个位点存有差异。这表明,过去半年里他的所有实验数据,皆是基于一个有偏差的模型而得出的。
“后来,老张跟我喝酒时感慨,假设,早半年做这个鉴定,能省下多少时间以及经费。”他算过一笔账,重新订购细胞株加上鉴定的费用,大概不到五千块,然而,因为数据不靠谱致使重复实验、延期交付、甚至被客户质疑,前前后后损失了十几万。
老张在换了新细胞株后,严格依照一种标准化的流程来操作,这个流程是每十代就要去做一次STR鉴定,还要定期对支原体污染情况进行检查,并且要保证冻存液的配比以及复苏步骤都和规范相契合。今年三月的时候,他参与的那个从事药物筛选的项目顺利完成结题,客户对于其中数据的重复性表现出了极为满意的态度。
就现在而言,老张逢人便讲一物,那便是细胞株,此等事物,乍一看似乎简单,然而实际上却是整个实验链条当中,最容易被人所忽视的如同“暗礁”般的存在。他归纳了几条经验:其一,切莫迷信所谓“祖传细胞”,因为哪怕是再稳定的细胞株,同样存在漂变的风险;其二,当引进新的细胞株之时,务必要去做STR鉴定,切不可贪图省事;其三,要构建起严格的传代档案,用以记录每一回复苏以及传代的日期、代次、操作人。
仅仅就在前些日子,他给我发送了消息,告知公司已然将他所负责拟定的这套流程,推广至整个实验室范围之内,新入职的员工所经历的培训的第一堂课,讲授的内容便是“细胞株管理规范”。此外, 他还以一种开玩笑的方式表示,伴随这一转变发生,自己从原本被称呼为“养细胞的老张”,转变成为了如今被叫做“训细胞的老张”。
要是你同样正为细胞株的挑选以及管理而犯愁,那么为何不不妨首先试着从开展一次STR鉴定着手呢。好多问题,当把它们查明白弄清楚 afterward反而就变得简单起来了。






