我认识了长达五年时间的朋友是老张, 他于一家从事生物技术相关业务的公司担任研发主管一职。上个月的时候, 他邀请我去喝酒, 喝了好几杯之后, 他针对最近一段时间所经历的事情跟我展开讨论, 我听完以后内心觉得格外有受到启发、得到感悟的感觉，所以就在今天把这件事情写下来并奉献给那些正在进行试剂选型工作的朋友们。
老张所在的公司, 主要从事免疫检测类产品的开发工作, 其中ELISA检测试剂盒是其业务的核心部分之一。去年年末的时候, 公司承接了一个政府项目, 该项目要求在三个月内完成针对一种新型标志物的检测试剂盒开发任务。老张一开始的时候信心十足, 毕竟他在这个行业当中已经工作了将近十年时间，什么样的艰难险阻没有经历过呢。
选型初期，我该从哪入手？
项目启动之后, 老张在第一时间就着手开始进行选型, ELISA检测试剂盒的选型对于后续实验的成败有着直接的关联, 他丝毫不敢掉以轻心, 他先是跑去了两家供应商所设置的展台, 之后又在网络上搜索了三天, 结果却是发现市面上的有关产品种类繁多、各式各样, 存在着这样的情况, 有的产品灵敏度比较高然而特异性却比较差, 还有的产品交叉反应较低可是操作太过复杂。
老张跟我讲起他的烦心事, 他把那几家声名远扬的大厂所生产的产品手册都翻了个遍, 然而随着翻阅的深入, 就越发觉得头疼不已。他运用传统的双抗体夹心法试剂盒已经有好些年头了, 可是在此次进行检测的时候, 所检测的抗原浓度低到了极点, 以至于普通试剂盒所呈现出的信号显著不足。就在那个时候, 他在自己的朋友圈发布了一条信息, 声称“ELISA检测试剂盒选型真的像是一门充满神秘莫测之感的学问”, 没想到这一举动引来了众多同行的评论, 其中有人建议采用竞争法, 还有人提议去试试生物素放大系统。
实验卡壳，到底该怎么破？
最终, 老张所选的乃是竞争法 ELISA 检测试剂盒的路线, 原因在于, 基于文献所示, 该种方案针对低浓度抗原的检测具备更大优势。他订购了两家不同品牌的试剂盒, 继而着手开展预实验。当第一批数据呈现出来之后, 他整个人陷入了极度惊愕的状态。
用来衡量标准曲线的R方值仅是0.89, 而CV值却超出了15%, 其重复性糟糕到了极点。老张将试剂盒说明书反复翻看了三次, 还对自身的操作流程进行了核查, 无论是加样时间, 亦或是孵育温度, 还有洗板次数, 均没有遗漏。他甚至于特意给供应商的技术支撑拨打了电话, 对方表示或许是样品基质干扰所引发的问题。
那段时期, 老张承受着极大压力, 项目进展已然延后了一周, 领导每日于群里催促进度。后来, 他与我讲, 那几日他大致吃住都在实验室, 盒饭凉透了才记起去吃。
换方案还是继续死磕？
进入第二周, 老张做出一项决定, 那便是更换试剂盒品牌, 他此次挑选的是同事所推荐的另外一个厂家生产的ELISA检测试剂盒, 听闻在血清样本里的表现极为稳定, 他再次订购了货物, 还耗费了一天时间去做梯度稀释实验。
新的一批数据呈现出来之后, 老张舒缓了一口气。标准曲线的R方值抵达了0.995, CV值降低到5%以内, 灵敏度也契合了项目要求。可就在这个时候, 他察觉到了一个新问题, 特异性实验当中显现出了微弱然而不能被忽视的交叉反应。
跟我谈及相关事由的老张有过这样的表述, 针对做ELISA检测试剂盒所开展的研发工作而言, 呈现出这般状况, 即每当成功解决掉一个问题之际, 另外一个问题顿时又会冒出来。彼时他身处实验室之内, 面对相关数据陷入呆滞状态长达十分钟, 末了下定决心作出调整样本稀释倍数这一决策, 与此同时还要对封闭液的配方予以优化。他为此耗用了三天时间, 进行了十六个条件组合的试验运行, 最终寻觅到了一个平衡点。
最终验证，结果怎么样？
老张将优化过后的 ELISA 检测试剂盒方案交给了项目组, 随后又开展了三批彼此独立的重复实验经再三确认数据全部称得上达标, 之后他自己亲自带着试剂盒去到有需求的客户那边进行现场验证, 客户那边使用他们出自自身的临床样本测上一遍并用老张的试剂盒跟一个进口品牌进行对比, 结果发现灵敏度处于不相上下的状态, 然而老张的试剂盒在操作所需要的时间当面缩短达到了四十分钟这么多。
当场, 客户明确确定了下单的意向。老张讲, 就在那一刻, 他认为之前所熬的夜都是值得的。
当他返回公司之后, 便开展文档总结的工作, 这份文档是整个选型流程的总结, 其中包含着不同品牌ELISA检测试剂盒的对比数据, 还有优化参数以及注意事项。后来, 这份文档被公司用作内部培训材料, 新入职于此地的进行研究与开发工作的同事们人手都持有一份。
老张跟我讲, 有过这一次经历后, 他心底最深的感触是, ELISA检测试剂盒进行选型时不存在便捷的途径, 然而胡乱地试探错误也是没什么必要的。要先将项目需求弄明白, 接着查看相关文献以及向同行取经, 而后结合自身的实验条件, 迅速地更新完善并加以验证。一旦选对了试剂盒, 随后的事情便会顺利起来。
最后, 他面带笑容地讲, 往后要是再度接到这类项目, 他首要做的并非去翻阅产品手册, 反而会是先去请同行吃一顿饭, 与之交流一下真实的使用感受。
