上个月,老张差点把实验室的电脑砸了。
我在中科院读博之时的室友乃老张, 如今于一家生物公司担任研发主管一职。他这人平日里脾气相当不错, 然而那日进行视频通话之际, 脸色黢黑好似锅底一般。“我的三个月数据, 全然报废了。”他点燃了一根香烟, 说话之时手部都在不停地颤抖。
说来这事儿, 得从今年三月开始提到起头。老张所在的那个团队, 承接了一个跟细胞代谢相关的项目。甲方催促得特别紧, 然而预算却卡得严严实实。为了节省费用, 老张在采购生化试剂盒之际, 挑选了一家从未听闻过的小品牌, 其价格仅仅是主流品牌的六成。当时他还满心得意, 认为节省的那些钱能够多去做几组实验。
然而结果究竟如何? 首批数据得以呈现, 其重复性糟糕至极。针对同一样本开展检测, 于早上进行操作和在下午进行操作, 所获取的吸光度竟然相差百分之三十。基于此种状况, 老张主观判断将错误归结于操作层面, 遂带领两名学生连续三个夜晚未曾休息, 再次校准相关仪器、反复进行实验操作。最终他经过仔细探究后发现, 实际问题并非出现在操作上面, 而是在于该批次试剂盒的批间差异过大而已。
知晓“批间差”这三个字的情况, 是做过生化实验之人都明白的事。以常见的ELISA试剂盒来讲, 不同批次的试剂呢, 要是抗体包被浓度、酶结合物活性存在细微差异, 那么出来的标准曲线便会出现偏差。老张所使用的那款, 同一盒里不同孔之间的变异系数都已然超过15%, 更不用说不同批次的情况了。
这并非是最为致命的, 到了四月中旬这个时候, 老张更换了一家属于国内知名品牌的生化试剂盒, 其价格稍微贵了一些, 不过心里想着大品牌应该总归是靠谱的, 然而结果新的问题又出现了, 即这批试剂盒的检测线性范围太过狭窄, 对于那些高浓度的样本而言, 有必要进行数十好几倍近乎稀释, 唯有如此才行落在标准曲线范围以内, 一旦稀释倍数增大, 误差也将伴随之而行呈现出放大态势, 老张依据着参考资料之中所列举出来的技术指标, 这其中包含线性范围、灵敏度、精密度、回收率, 才发觉自己当初在采购的时候, 根本就没有仔细去查看这些参数。
“我觉得只要品牌够大就可以了, 别的全都是虚假的。”老张于电话当中露出苦笑。他把那批试剂盒的说明书找了出来, 其检测范围仅仅是0.1到10μg/mL , 然而他的样本浓度通常全都在50μg/mL之上。按照参考资料里所讲的, 理想状态下的生化试剂盒, 线性范围起码得涵盖样本浓度的80%以上, 不然后续的稀释操作将会引入系统误差。
历经这两轮较为麻烦的情况, 项目已然延期了一个月。甲方那儿每天都打电话催促, 老张的头发一把又一把地脱落。五月中旬的时候, 他狠了狠心, 耗费一星期时间, 对市场上主流的生化试剂盒品牌全都调取了资料, 对照参考资料里的评价维度, 也就是特异性、灵敏度、重复性、稳定性、操作便捷性,制作了一个颇为详尽的对比表。
他发觉, 切实可靠的生化试剂盒, 并非仅依据品牌规模, 更需考量具体的应用情形。就像他所做的细胞代谢相关指标的测定, 要求试剂盒对细胞裂解液里的繁杂基质具备较高的耐受能力, 不然基质效应会对结果造成严重干扰。参考资料当中提及, 良好的试剂盒厂家会给出基质效应验证数据, 然而市面上诸多产品根本不会提供此项内容。
老张挑选了一家于行业内口碑挺好然而并非极其知名的品牌, 其价格相较于之前那款大品牌抬高了20%, 不过各项技术指标均契合参考资料里所推荐的标准, 批间差小于5%、线性范围涵盖0.05 - 100μg/mL、回收率处于95% - 105%之间。在六月上旬之初, 运用新试剂盒重新审结完第一批数据后, 老张给我发来一条语音, 声音当中挟带着久违的轻松感说道: “妥了, 这次数据漂亮得很呐, 甲方都夸赞我们效率高。”。
当下, 老张形成了一种习惯, 在每次采购生化试剂盒之前, 他会先将参考资料里那七个评价维度打印出来, 然后一项一项地去核对。他跟我讲, 在科研这个领域, 能省钱的地方有不少, 然而试剂盒是绝对不可以节俭的。他还说, “你所省下的那一小部分钱, 最终都会演变成你所浪费的时间、报废的数据以及甲方的投诉。”。
前几天我们用餐时, 他还在念叨着, 要是上一年就知晓这些诀窍, 那三个月的数据也就不会白白浪费了。我询问他后来那批小品牌试剂盒是如何处置的,他表示扔掉了一半, 余下一半留着给新来的实习生用于练手。“这也算是废物加以利用了。”他微微一笑, 眼神里却透着过来人才有的那份清醒。






