去年那个夏天时节, 我于一家生物科技公司担任研发主管一职, 职责是负责细胞代谢产物的定量分析工作。彼时团队里刚刚新进了一批样品, 老板急切催促要得出数据, 于是我每日都在实验室里一直泡到午夜时分。说实话, 就在那段时期压力格外巨大, 原因在于手头所使用的那款国产试剂盒, 每次做出来的标准曲线都呈现不稳定状态, 平行性差到了极其离谱的程度。第一批数据提交上去之后, 被质检那边打回来三次, 不客气地讲, 我甚至都快要怀疑自己是不是在操作方面存在问题了。
这事后来被我一个叫老张、在做检测试剂方面有工作经历的朋友听说了, 他特意从苏州赶过来探望我。老张从事试剂研发工作已经历经七八年时间, 他瞅见我那一堆废弃的数据后不禁笑了起来, 并且说道: “你所使用的这个试剂盒, 其稳定性系数处于较低水平, 酶的活性保存期限存在问题。”他向我推介, 说可以试试看他们公司新近呈现的分光光度检测试剂盒, 还表示该试剂盒对底物配方以及缓冲体系进行了优化, 标曲的R值能够达成0.999以上的条件。我当时处于半信半疑的状态, 然而实在是没有其他办法可想, 于是就让他给我邮寄过来几盒。
测试的第一批是在八月中旬落实达成的, 我依据老张所给予的方案, 预先一天自四度之冰箱拎取出试剂盒使平衡至室温, 随后严谨依照所示说明书里的加样量予以操作, 其最终效果于我而言着实颇为出乎意料, 三个平行孔, 吸光度数值的偏差仅仅只有百分之二点三, 相较之前的那一款而言提升幅度超过一倍之多, 最令我安心的是, 连续举行了五天的重复实验, 其批间差竟然稳定处于百分之五以内, 这在以往是连进行展望乃至联想之勇气都未曾具备的, 毕竟分光光度检测最为惧怕的便是批间差异巨大, 特别是在开展长时间动态监测之际, 一旦数据出现漂移状况, 整个时间曲线便必须得重新来过。
当然了, 并非一开始就能够一帆风顺。等到使用到第二周的时候, 有一回我因为赶时间, 把样品稀释倍数算错了, 致使测出来的浓度偏高了一大截。当时我的第一反应是试剂盒出现了问题, 立刻打电话给老张。他听完之后让我把原始吸光度值发送过去, 还让我把标准曲线公式核对一遍。结果发现是我自己把稀释因子写成了10倍, 而实际是20倍。老张在电话里对我说: “分光光度检测试剂盒这玩意儿, 其本身原理很成熟, 出问题八成是前处理或者计算环节。”。你需要将每一个步骤之中的细节严格把控极为精细, 尤其是加样的手法, 在使用移液器的时候务必要缓慢吸取快速打出, 以此来防止气泡产生。
我的思路被老张讲的这句话给点醒了, 自那之后, 我养成这样一些习惯, 每当开启新的试剂盒时, 首先要用空白对照去运行一遍, 以此来确认本底吸光度处于0.005以内, 之后要去做三个浓度梯度的质控样品, 进而验证回收率, 粗略算来耗时大约两个月, 我将这套流程予以固化, 团队里的三个新人依据这个SOP去操作, 也都获取到了可靠的数据, 去年年末的时候, 我们上报的批次一致性验证报告, 一次性就通过了审核, 这在公司内可是首次出现。
今年3月, 公司另外承接了一个规模较大的项目, 那项目要求要同时对几十种代谢物的含量变化展开检测 , 传统液相色谱法速度迟缓, 并且成本高昂, 我坚决选用了老张所推荐的那款分光光度检测试剂盒 , 此次我们对样品前处理予以优化, 将裂解液与终止液各自的pH值调节到7.2, 以此防止出现非特异性显色情况 , 最终, 整个项目仅仅耗费两周便完成了全部检测,比预算时间提前了五天。
于当下回忆起来, 选对分光光度检测试剂盒仅仅是起始的一步, 而真正能够让人内心安稳踏实的乃是将每一个细微之处加以妥善管理。就好比酶标仪的波长校准, 我每隔一个月便会去做一回, 以此来保证读数的精确无误;在试剂盒开封之后, 我都会在其管壁上面标记下日期, 一旦超出规定的有效期便坚决不会使用。诸如此类看似繁杂琐碎的习惯, 实际上才是确保数据可信度高的根本基础。
于是, 要是你同样处于对分光光度检测试剂盒究竟该如何挑选而感到纠结的状况, 我的提议是: 首先去查看参数, 像是线性范围、灵敏度、批间差这些;接着去考察实际数据, 向同行或者供应商索要一份涵盖完整内容的验证报告;最终, 务必要亲自上手进行尝试, 运用你的样品去运行一回, 体会一下稳定性和重复性如何。千万别仅是着眼于价格, 价格低廉并不一定就意味着能够节省费用, 返工所耗费的时间以及精力才是最为昂贵的。






