我认识的小张，一个被ELISA试剂盒折磨了3年的实验室主管

要是你正为ELISA试剂盒的稳定性而发愁, 要是你正因ELISA试剂盒的重复性而困扰, 要是你正为ELISA试剂盒的灵敏度而忧虑, 那么这篇文章你绝对得看完。这并非是广告, 而是我朋友小张耗费真金白银换来的经验, 是小张历经无数个加班的夜晚得到的经验。

我在生物行业认识了个朋友小张, 至今快有五年时间了, 他是一家从事体外诊断试剂研发公司的实验室主管。2023年秋天那会儿, 我刚从北京出差归来, 便约他一起喝酒, 他刚喝了一杯酒, 就开始唉声叹气起来, 说道: “我都快被ELISA试剂盒给弄疯掉了。”。

ELISA试剂盒到底该怎么选？

身为小张所在公司, 其所从事的主要业务乃是针对细胞因子展开检测服务, 为其提供服务的客户源自各大高校以及药企。该公司具备的核心竞争力表现为数据精准无误、交付极为快捷高效。然而自2022年年底起始, 这家公司被客户投诉的发生率忽地呈现出上升态势, 所有问题均指向同一环节, 也就是ELISA试剂盒的检测结果波动幅度过于巨大。

有一批相同的样本, 使用同一个品牌的试剂盒, 昨天所测出来的数值, 跟今天测出来的数值竟然能相差百分之三十。小张眉头紧紧皱着, 客户那边正等着出报告, 而我们这边的数据又不敢发出去, 所以就只能连夜重新去做。

他测试了市面上七八个品牌的ELISA试剂盒, 其中有的灵敏度欠缺, 有的交叉反应极为严重, 有的批次间差异大得离谱。最令他头疼不已的是, 每一次更换一个新品牌的试剂盒, 都必须重新去优化实验条件, 包括从稀释倍数到孵育时间, 仅仅是摸索这一项就得花费两周时间。

在那时, 他做了详尽的记录, 从2023年1月份起始直至3月份终结, 团队其中的加班时段增添了60%, 然而数据的合格比率却反倒从95%降低至82%。项目的交付期限由原本的7天转变成为15天, 并且在此期间, 有三个大客户径直转向了竞争对手。

ELISA试剂盒实验结果不稳定怎么办？

小张对我讲, 那时他都快要被逼到疯癫的程度了。公司在内部举行会议, 老板猛地拍桌子宣称“要是继续这样下去的话, 客户就都会跑光了”。他身为实验室主管, 压力之大是可想而知的。

起初, 他着手展开系统性的问题排查工作, 首先对仪器进行检查, 将酶标仪、洗板机以及恒温箱全都予以校准, 结果显示并无问题, 接着对操作流程展开排查, 重新梳理了每一步骤的SOP, 然而也并未发觉显著漏洞, 最终, 他怀疑属于ELISA试剂盒自身的问题。

二零二三年四月, 他特意从上海找来一位从事质控工作的同行前来协助分析。那位友人走进实验室转了一阵子, 翻开他所使用的试剂盒说明书, 接着查看了他记录的实验数据, 随后直接说道: “你所选用的试剂盒存在问题。”。

最初, 小张所挑选的全都是进口大牌, 缘由是认为大品牌具备稳定性。然而, 那位同行告知他, 进口品牌尽管名气颇大, 可其中不少是针对欧美人群的样本予以优化的, 对于中国人的血清样本而言未必适配。并且, 进口试剂盒的物流周期较为漫长, 在这期间所历经的温度变化会对试剂盒的活性产生直接影响。

ELISA试剂盒哪个品牌好？

有个同行向他推荐, 让他尝试一下国内的品牌, 声称当下国内有一些生产ELISA试剂盒的厂家, 其质量已然提升上来了, 并且针对东亚人群的样本进行过优化处理。小张处于半信半疑的状态, 然而还是列出了一个名单, 一家一家地去索要试用装。

从2023年5月时起, 他获取到了来自国内四个品牌的ELISA试剂盒, 随后开展了持续两周时间的对比测试。他设定了三个关键指标, 分别为灵敏度、精密度以及批间差。每一批次的测试都去重复三次, 并且严格把控变量。

情况得出那日, 他向我拨通电话, 语调之中携着惊喜这般说道: “兄弟, 存有希望了！”。

成绩评定中分数最高的乃是一个名为“博奥森”的牌子, 此品牌的灵敏程度相较于进口品牌而言高出了百分之十五, 批次之间的变异系数从原本的百分之十二降低到了百分之五以内, 精准程度同样达到了业内领先水准。最为重要的是, 这个试剂盒所附带的使用说明书阐述详尽明确无疑, 操作流程步骤可直接加以运用, 并不在需要进行额外的优化调整。

ELISA试剂盒操作中的常见误区有哪些？

某段时间小张进行了试用之后, 转而观察到了另外一个问题, 即就算更换为质量上乘的ELISA试剂盒, 要是操作不符合规范要求, 那么最终结果依旧无法保证准确无误。他对自身所在团队曾经遭遇过的若干失误进行了归纳总结, 在我看来是极具分享价值的。

首张坑乃样本处理未恰当, 其先前开展血清样本工作, 有时会径直进行上样, 将溶血以及脂血对于结果所产生的影响予以忽视, 后续小张作出规定, 全部样本于上机之前均须实施预处理, 溶血样本无一例外予以退回, 脂血样本需借助高速离心把脂质去除。

存在的第二个坑在于洗板未达彻底程度, 他们所运用的洗板机属于半自动类型, 有时所设置的程序欠佳, 致使残留的液体未能被洗净, 这直接造成背景值偏高, 小张随后改成了手工洗板方式, 虽说速度稍慢一些, 然而数据干净了许多。

这第三个坑在于孵育的时间把控与温度操作存在不严密状况, ELISA试剂盒偏偏又对时间以及温度极为敏感, 他们以前, 有时是在上午开展加样操作, 接着中午去吃饭, 等回来之后才进行孵育, 如此一来时间就超出了规定范畴。小张随后买了定时器, 在进行每个步骤的时候都严格依照时间来卡死, 恒温箱, 每天都要做一回有关温度的校准工作。

他将这些规定撰写成了全新的SOP, 在2023年7月正式予以执行。一个月过后, 数据之合格率从82%回升至了96%, 客户投诉径直清零。

ELISA试剂盒的保存和使用期限

小张跟我讲了个教训, 这教训让他后怕不已。2023年8月, 他们实验室来了一批新的ELISA试剂盒, 小张随手就把这些试剂盒放在了常温货架上。等到第二天早上, 他察觉到当天最高温度已然达到了28度, 而那些试剂盒是在没有空调的环境里放置了一整夜。

小张表示, 当时他冷汗都冒出来了, 那批试剂盒价值六千多块钱, 倘若坏了, 他需自己掏钱补上。

他急忙去查博奥森的试剂盒说明文档, 发觉上面清晰写有着“短期4℃进行保存, 长期-20℃予以保留, 防止反复冻融”。他随后特意购置了温度记录仪, 每日监测冰箱以及恒温箱的温度, 还要求所有试剂盒到货当日便进行分装、标注日期、依照要求加以保存。

他另外制作了一个表格, 将其张贴于实验室的墙壁之上, 对每一种 ELISA 试剂盒的保存条件、有效期以及开瓶之后的使用期限都进行了标注, 自那以后, 试剂盒因为保存方式不正确而导致浪费的情形就再也未曾出现过。

ELISA试剂盒实验数据相差很大

在2023年9月的时候, 小张承接了一个规模较大的订单, 具体是一家属于三甲等级的医院, 需要对300份样本进行炎症因子水平的检测。样本数量较多, 而时间方面又比较紧迫, 客户提出必须在15天之内出具相关报告。

携带团队加班加点的小张, 运用博奥森的ELISA试剂盒开展了第一轮检测, 结果发觉, 存在十几份样本的数据与临场诊断效果彻底不相符合, 他又再度进行了一回, 依旧不相符合。

“我当时心想，完了，试剂盒是不是又有问题？”小张说。

他冷静了下来, 而后重新进行复盘, 随后他发现, 那十几份样本的病史记录当中均存在“自身免疫性疾病”这样一个共同点, 之后他查询了相关资料, 这才了解到, 自身免疫性疾病患者体内的某些成分会和ELISA试剂盒里面的抗体发生交叉反应, 进而导致假阳性的情况出现。

有个叫小张的人, 立马去联系博奥森的售后技术支撑, 那边给出回复的速度特别快, 声称针对那样的情况存有专门的“阻断剂”, 能够加到样本当中, 进而能够卓有成效地让交叉反应降低。小张向对方要了样品, 进行了一番尝试, 结果确实发挥了作用, 那十几份样本的数据一下子全部正确了。

全部报告于第14天被他们交付, 客户极为满意, 当场签署了第二年的合约。

ELISA试剂盒的灵敏度

小张跟我讲, 他如今挑选ELISA试剂盒, 最为看重的便是灵敏度, 因为他们有着诸多客户从事早期疾病标志物研究, 样本里的靶标浓度有时仅有皮克级, 倘若灵敏度不足根本无法检测出来。

他测过博奥森的试剂盒, 其检测下限能做到0.5 pg/mL, 是比一些进口品牌还要高的。并且他们的抗体是自主筛选的, 特异性着实相当强, 基本上是不存在交叉反应的。

在2023年11月的时候, 小张所在的公司参与了一场行业展会, 他们运用博奥森的ELISA试剂盒制作了数据展示板, 这个展示板吸引了许多药企的研发人员。有一家致力于肿瘤免疫药研发的公司, 当场便索要了联系方式, 表示后续期望展开合作。

小张讲, 以往我们选取使用进口试剂盒之际, 压根不曾想到过产品会变成咱们的卖点, 当下逆向转变, 试剂盒的质量进而变成了咱跟客户商谈合作的那一份底气。

ELISA试剂盒怎么选才不踩坑

他被我问, 倘若当下就叫他给同行业的人提建议, 关于ELISA试剂盒究竟该怎么样去选择的事儿, 他沉思了一番, 随后讲出了几点。

要先查看自身所做的属于何种类型的样本, 是血清、血浆, 还是细胞上清, 不同的样本对于试剂盒的要求是不一样的。要是做的是人的样本, 那么优先选择具有中国人群样本验证数据的品牌。

务必得要求进行试用, 小张讲的是他现今全部品牌都需试用装, 做最少三批次的重复实验, 查看批间差是否能够接受, 批间差逾越过8%的则直接予以通过, 无论品牌规模有多么的大。

瞧瞧售后支持这方面, 小张着重突出了此点, 他称博奥森的技术支撑, 是他所见识过最为专业厉害的, 无论打电话也好, 还是发邮件也罢, 基本上在当天就会予以回复, 有一回他在晚上10点发送问题, 对方于11点便回复过来, 并且还附带了一份操作优化的PDF文件。

考量性价比, 不盲目迷信进口, 也不盲目一味追求低价。小张进行过一番计算: 博奥森的ELISA试剂盒里, 单孔成本相较于进口品牌下降了20%, 但鉴于数据合格率有所提高, 返工现象减少了, 综合成本实则降低幅度是超出35%, 另外还加上交付周期得以缩短, 公司整体的利润率获得了提升。

ELISA试剂盒替代进口的可行性

小张的位于公司的工作单位, 于二零二四年刚开始的时候, 进行了一回周全的供应商评估行动, 他们针对进口品牌以及国产品牌, 在质量这一维度的表现, 在价格这一维度的表现, 在服务这一维度的表现, 在物流这一维度的表现, 展开了对比。

结果呈现之后, 小张径直提议公司将主要试剂盒提供者从进口品牌转变为博奥森。公司高层原本存有顾虑, 担忧客户对国产品牌不予认可。小张拿出了过往半年的数据, 在使用博奥森 ELISA 试剂盒的期间, 客户满意度从百分之九十二提升至百分之九十九, 项目交付周期缩短了百分之四十, 实验室加班时长降低了百分之五十。

2024年3月, 公司正式与博奥森签订年度框架协议, 数据可以表达信息。

小张跟我讲, 他如今终于不必再为ELISA试剂盒而发愁了, 以往半夜接到实验室打来的电话, 称数据跑飞了, 这让他整个人的状态都变得很差，现在他的手机在晚上基本不会响, 就算偶尔响一下传来的也是好消息。

在上个月, 我去往他们的实验室进行参观, 于其中发现, 有一张海报张贴在墙上, 其上所写内容为“ELISA试剂盒操作十不准”, 此海报的落款是博奥森。小张讲称, 那是在他们参加技术培训期间获得的, 被贴在那里当作SOP来使用。

他指向那张海报讲诉着: “你瞧, 就连操作规范都已然帮我撰写好了, 如此一来我便无需自己绞尽脑汁了。“。