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发布日期:2025/8/26 13:55:00

ELISA实验中,抗凝剂用于防止血液样本凝固。抗凝剂对ELISA(酶联免疫吸附测定)的影响主要体现在对样本处理和检测结果的潜在干扰上。不同类型的抗凝剂可能会影响ELISA的准确性,具体影响因素包括:

1、抗凝剂类型对检测结果的影响

EDTA-K2抗凝剂:研究表明,使用EDTA-K2抗凝剂对抗-HIV、抗-HCV、HBsAg及抗-TP的检测结果产生了较为明显的干扰。例如,在一项研究中,采用EDTA-K2抗凝剂的样本中,抗-HIV阳性检出率为0.15%,抗-HCV阳性检出率为1.29%,HBsAg阳性检出率为1.61%,抗-TP阳性检出率为0.15%1。这表明EDTA-K2抗凝剂可能对这些项目的检测结果产生了一定程度的干扰。

2、抗凝剂与试剂盒的兼容性

不同的ELISA试剂盒可能对样本中的抗凝剂有特定的要求。如果所使用的抗凝剂与试剂盒不兼容,可能会导致检测结果的偏差。

3、抗凝剂的选择

不同的抗凝剂如EDTA、肝素、柠檬酸钠等,其化学性质和作用机制不同。例如,EDTA通过螯合血液中的钙离子来防止血液凝固,而肝素则通过增强抗凝血酶III的活性来阻止血液凝固。选择不当的抗凝剂可能会影响样本的稳定性,进而影响ELISA的检测结果。

4、肝素钠抗凝剂对ELISA检测的影响

酶活性抑制:肝素钠可直接抑制ELISA系统中辣根过氧化物酶(HRP)的活性,导致显色信号减弱,尤其在以HRP为标记物的检测中易出现假阴性。

样本适用性:在血液免疫四项(HBsAg、HCV-Ab、HIV-Ab、TP)检测中,肝素钠抗凝标本的反应性检出率显著低于EDTA-K₂,但需注意其对酶促反应的普遍抑制作用

5、抗凝剂对样本处理的影响

样本保存与处理:采供血机构应避免对含CPD保养液的标本进行ELISA法检测,以提高TP检出率,确保输血安全。此外,为了防止阳性标本的漏检,建议血袋生产厂家延长针头与血袋连接处的血液管道的长度,使其不仅能满足检测留样的要求,还能满足保存留样的要求

综上所述,抗凝剂的选择对ELISA实验的结果有着显著的影响。为了确保ELISA检测结果的准确性,选择合适的抗凝剂并遵循正确的样本处理步骤至关重要。

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