考马斯亮蓝法测蛋白含量测定试剂盒说明书
微量法 100T/96S
注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
样品可溶性蛋白质含量常常用于酶活性计算。此外，可溶性蛋白质含量也用于食品等质量分析。
测定原理：
在酸性溶液中，考马斯亮蓝G-250与蛋白质结合形成蓝色复合物；该复合物在620nm处有最大吸收峰， 其颜色的深浅与蛋白质的浓度成正比。该方法灵敏度高，适合微量蛋白质分析。
自备仪器和用品：
离心机、酶标仪、96孔板、移液器和蒸馏水。
试剂组成和配制：
试剂一：液体11 mL×1瓶，4℃保存。
样品中可溶性蛋白质提取：
冰浴匀浆，8000g，4℃离心10min，取上清，即待测液。（动物样品常常需要稀释）
测定操作：
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试剂（μL） |
测定管 |
空白管 |
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样本 |
100 |
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蒸馏水 |
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100 |
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试剂一 |
100 |
100 |
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混匀后，测定波长620 nm吸光值，△A=A测定-A空白。 |
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注意：空白管只需要测定一次。
计算公式：
标准曲线：y = 7.1265x - 0.0007 R2 = 0.9997 x: 蛋白标准品浓度(mg/mL)
y: 吸光值差值
1.按液体样本体积计算：
Cpr（mg/mL）=(△A+0.0007)÷7.1265
=0.1403×(△A+0.0007)
2.按组织样本质量计算：
Cpr（mg/g）=(△A+0.0007)÷7.1265×V总÷W
=0.1403×(△A+0.0007)÷W
V总：提取液体积，1 mL; W：样本质量，g。
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资料/datasheet
