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商品属性：
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产品名称 |
规格 |
货号 |
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热敏双链DNA特异性核酸酶(HL dsDNase) |
100U |
A-PJ1114 |
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热敏双链DNA特异性核酸酶(HL dsDNase) |
1,000U |
A-PJ1114 |
描述：
热 敏 双 链 DNA 特 异 性 核 酸 酶 (Heat labileds-DNA-specific Nuclease ，又名 ezDNase 或 HLdsDNase)，为双链特异性核酸酶。其特异性的识别降解双链 DNA，对单链 DNA 或 RNA 几乎无活性，其降解 dsDNA的能力比 ssDNA 高~5000 倍。除此外，该酶降解双链 DNA的能力比 bovine DNaseI 高~30 倍，因此特别适用于去除RNA 样品中的基因组 DNA 污染。该热敏型双链 DNA 核酸酶可将 DNA 降解为 2~8bp 的产物，且 55℃ 5min 可使该酶不可逆失活，同时又能保持 RNA 和 ssDNA 的稳定性。除此外，本酶适合于，对基因组样品进行酶法片段化反应。
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储存：-20℃ 可保存 3 年。
活性定义： 1 单位指 25°C 条件下 15min 将 10μg 基因组DNA 消化至 80%的产物<500bp，所需的酶量。
使用注意事项
（1）1×dsDNase Buffer：20mM Tris-HCl pH8, 5mM MgCl2。该酶需要 1~5mM MgCl2。
（2）该酶对 K+敏感，反应体系中推荐 K+浓度低于 40mM。
（3）通常在 RT 反应中的用量为 0.1~0.5U/20 μl 体系。
（4）任何浓度的 SDS、盐酸胍均抑制该酶活性。
（5）该酶的最佳反应温度为 25~37℃，42℃ 30min 后活性损失 70%。
使用实例 1（对基因组 DNA 进行片段化反应）
1. 按以下组分配制反应体系
基因组 DNA 10 μg
10×dsDNase Buffer 2.5 μl
HL dsDNase (2 U/μl) 0.5-1 μl
Rnase Free H2O Up to 25 μl
2. 室温 25°C 孵育 15min，55~65°C 5min 加热失活。
使用实例 2（基因组 DNA 的去除）
1. 按以下组分配制反应体系
基因组 DNA 1 μg
10×dsDNase Buffer 2.5 μl
HL dsDNase (2 U/μl) 1 μl
Rnase Free H2O Up to 25 μl
2. 室温 25°C 孵育 30min，55~65°C 5min 加热失活。此时
基因组 DNA，通常 90%以上的产物被消化至<15bp
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资料/datasheet
