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土壤多酚氧化酶(SPPO)检测试剂盒
AS6331110
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AS6331110-100管/96样 96T ¥800.00 登录查看
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产品详情

意 :正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

S-PPO 主要来源于土壤微生物、植物根系分泌物及动植物残体分解释放,催化土壤中芳香族化合物氧化成

醌,醌与土壤中蛋白质、氨基酸、糖类、矿物等物质反应生成有机质和色素,完成土壤芳香族化合物循环,

用于土壤环境修复。

测定原理:

S-PPO 能够催化邻苯三酚产生有色物质,后者在 430nm 有特征光吸收。

自备用品:

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、乙醚 50mL(不

允许快递)和蒸馏水。

试剂组成和配制:

试剂一:粉剂×2 瓶,4℃保存;临用前取一瓶,加入 7mL 蒸馏水充分溶解后待用;用不完的试剂 4℃保存

一周。

试剂二:液体 6mL×1 瓶,4℃保存;

试剂三:乙醚 50mL×1 瓶,4℃保存;(自备)

样品处理:

新鲜土样自然风干或 37 度烘箱风干,过 30~50 目筛。

测定步骤:

1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 430nm,蒸馏水调零。

2、 加样表

振荡数次,室温静置 30min,取 200μL 上层液于 430nm 处测定吸光值 A。

(注意:1、因乙醚粘度小,易掉液,吸取前需先将枪头在上层液里润洗 2~3 次,再转移测定;2、乙醚易

挥发,转移到 96 孔板后立即测定,最好一个一个测定)。

S-PPO 活力计算

a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准条件下测定的回归方程为 y = 8.97x -0.003;x 为标准品浓度(mg/mL),y 为吸光值 A。

单位的定义:每天每 g 土样中产生 1mg 紫色没食子素定义为一个酶活力单位。

S-PPO 活力(mg /d/g 土样)=(A+0.003) ÷8.97×V 反总÷W÷T=80×(A+0.003)

T:反应时间,1h=1/24d; V 反总:反应体系总体积 0.6mL;W:样本质量,0.02g。

b.96 孔板测定的计算公式如下

标准条件下测定的回归方程为 y = 4.485x -0.003;x 为标准品浓度(mg/mL),y 为吸光值 A。

单位的定义:每天每 g 土样中产生 1mg 紫色没食子素定义为一个酶活力单位。

S-PPO 活力(mg/d/g 土样)=(A+0.003) ÷4.485×V 反总÷W÷T=160×(A+0.003)

T:反应时间,1h=1/24d; V 反总:反应体系总体积 0.6mL;W:样本质量,0.02g。

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