生物技术领域的基石操作便是这细胞培养，然而新手常常易于陷入那“照搬说明书”的误区之中。从本质上来说，此项技术所考验的乃是对于细胞生理需求的领会以及无菌操作的严谨程度。在实验室探寻多年之后，我发觉与其去生搬硬套那些步骤，倒不如先将几个决定成败的关键控制点彻底理解通透。

如何防止细胞污染

细胞房当中，最为大敌的是那肉眼难以瞧见的微生物，防止污染其核心之处为分区进行管理以及动作要规范，其中培养基、耗材以及操作区域必定得实施物理隔离，进入细胞房之前需要去更换专用的实验服并且要彻底地洗手，操作之际，手臂尽量别在敞口瓶上方去移动，移液枪使用完毕后要即刻更换枪头，定期对培养箱水盘予以清理并且添加抑菌剂，如此便能大幅度地降低真菌和支原体爆发的风险。

细胞培养需要哪些设备

不少人觉得只要有超净台以及培养箱就行，实则并非如此。除了关键的二氧化碳培养箱跟生物安全柜之外，一台可靠的倒置显微镜乃是判断细胞状态的“眼睛”。离心机建议挑选带有水平转子的那种，这样能最大限度地保护细胞活率。另外，一个精确的移液器以及经过验证的耗材同样是很关键的——劣质培养瓶的透气盖有可能在换液的时候引入污染源的。

怎样判断细胞状态好坏

不要仅仅盯着细胞密度，形态学以及生长曲线才是关键指标。具备健康状态的细胞在贴壁之后轮廓清晰可见，其折射率较高，另外在分裂期期间能够观察到显著的“煎蛋”形态。要是出现空泡，或者颗粒感增强，又或者漂浮死细胞数量急剧增多，那就表明环境方面产生了问题。当传代之后细胞恢复到对数生长期所需的时间超过24小时 ，便要去检查培养基成分是不是已经失效，或者血清批次存不存在差异。

提及至此，事实上每一位参与实验者都会遭遇到这样的困惑，即明明操作是正确无误的，然而细胞却未能成功养活，你觉得在细胞开展培养的整个过程之内，最容易被人物色忽视掉的那种如同隐形杀手一般存在的因素，是操作的具体手法，还是环境所具备的洁净程度，又或者是试剂批次之间存在的差异？