实验室检测蛋白表达水平常用的工具是科研ELISA试剂盒，然而面对市场上好多个品牌以及各种各样的规格，好多研究者通常都不知道该从哪里着手。要是能正确选择并且规范使用ELISA试剂盒，那可是和实验数据的准确性以及可重复性直接相关的。

科研ELISA试剂盒怎么选

首先，要关注试剂盒所检测的物种以及靶标蛋白，看其是不是和你的样本相匹配。不同的试剂盒，适用的样本类型，像细胞上清、组织裂解液、血清等，是存在差异的，在购买之前，一定要仔细核对说明书里的样本验证数据。其次，灵敏度与检测范围属于关键指标，灵敏度应当是低于预期样本的最低浓度的，检测范围要能够覆盖所有样本的浓度区间。

操作步骤有哪些关键点

样本制备的环节当中，要防止出现反复冻融的情况，建议采用分装的方式来进行保存。加样之时，要留意移液器的校准以及枪头的更换，以防引起交叉污染。孵育的温度以及时间，要严格依照说明书去执行，恒温箱或者水浴锅需要预先进行预热，并且校准温度。洗涤的步骤不能予以简化，推荐运用自动洗板机并配合手动拍板，以此确保每次洗涤之后残留液的量保持一致。

结果不理想怎么办

当标准曲线相关系数R²低于0.99之际，要去检查标准品稀释是不是准确，推荐运用带滤芯吸头去进行并充分混匀。高背景值一般是源于洗涤不充分或者封闭液失效，能够增加洗涤次数或者更换新鲜封闭液。无信号或者信号过弱的情况则需要验证抗体是不是失效，与此同时排查底物是不是变质。记录每一次异常现象并且对照说明书troubleshooting表格逐步展开排查，逐步积累经验便能够提升成功率。