朋友老张的困境：实验做得越多，失败越多
前段时间, 我与在大学做科研的朋友老张一起吃饭, 他满脸愁容地告诉我, 这几天快被实验弄疯了, 越做越感觉不正常。老张搞分子生物学, 手上有好几个项目都在检测环节遇到阻碍。每次跑完数据, 要么背景高得出奇, 要么重复性差得令人抓狂。他对我说, 明明是依照标准流程操作的, 为何结果就是不对呢?
其实, 好多从事做实验的人都存在着类似的状况。特别是在涉及微量样品这个方面的时候, 那些传统的检测手法, 要么就是灵敏度达不到要求, 要么操作起来太过繁杂琐碎, 只要稍微一不小心, 那就全部白费力气。老张那个时候用的居然还是自己配置的试剂, 从进行称量开始, 再到溶解进而调整pH值, 每一个步骤都谨慎小心得很, 不过实验所得到的数据, 却依旧好似过山车那般一会儿高一会儿低不稳定。
为什么微量法检测试剂盒能解决他的问题？
实验的黄金定律：稳定压倒一切
那段时间, 老张几乎每日都在重复同一个实验, 该实验乃是检测细胞裂解液里某一种蛋白的浓度, 他所使用的是一套由自己配制的ELISA试剂, 底物源自自己购买, 抗体由自己进行稀释, 洗液同样是自己配制而成, 听起来似乎并无问题, 然而实际情形却是, 不同批次所配出来的试剂, 其活性总会存在差异。
曾有一回, 他于周一所配制的底物, 与周三所配制的底物, 于同等浓度的标准品情形下, 其吸光度值相差了将近百分之四十。这般波动径直致使他三天的工作全然作废。老张当时愤怒得拍桌子, 言道: “若再如此这般地干下去, 我的论文便别想发表了。
之后, 我同他讲道, 你何不去尝试一下微量法检测试剂盒。起初, 他还存有迟疑, 言道: “购买试剂盒是何等昂贵, 自行配置的较为便宜些。”但因经历了这一回的失败, 他狠下心购置了一盒。
操作复杂？不存在的
有一回, 老张头一回采用微量法检测试剂盒之际, 简直就不太敢去相信操作居然能够这般容易。所有的试剂全都是现成的, 只需要依照说明书里所标示的各步骤分别进行加样、孵育、洗涤以及读板这一系列操作。他甚至于都不需要亲自去计算浓度, 这本试剂盒自身配备了标准品, 只消直接做出一条标准曲线便能够得出相应的结果。
在最为关键的一点上, 往昔自己去配制试剂之时, 每一回都得是现配现用才行, 要是放置的时间久了些, 那活性便会有所下降。然而试剂盒当中的试剂是经过了冻干或者稳定化这类处理的, 在打开盖子之后, 于一定的条件之下能够维持很长时间的活性。老张经过一番计算得出, 一盒试剂盒能够用来做几十次实验, 算下来单次实验的成本并没有比自己去配制高太多, 可是所节省下来的时间以及精力却是无可估值的, 贵重得很呢。
从数据翻车到数据漂亮：老张的转折点
第一次实验就让他震惊了
老张做的第一批样品, 是用微量法检测试剂盒弄出来的, 数据冒出来之际, 他自己都没法相信。同一个样品, 重复了三回。CV值, 也就是变异系数, 仅仅只有2.3%。这到底是啥概念呢? 先前他自己配制试剂时, 同样的那个样品, 重复三次, CV值常常会跑到10%以上。
他立刻将先前那些宣告作坏之样品再度进行了一遍操作。随后发觉，诸多往昔认定为“样品存有问题”的数据, 实则乃试剂方面的问题。运用试剂盒予以重新检测之后, 数据的一致性相当出色, 并且灵敏度相较于自行配制的提升了起码一个数量级。
微量样品也能精准检测
就在老张所负责开展的项目当中, 常常得运用到数量极其稀少微量的样品, 像那种单个细胞的裂解液, 又或者是经过稀释处理之后的核酸提取物。以往要是采用常规的方法, 这些样品通常会出现检测不到信号的情况, 要不然就是信号微弱程度太过, 根本没有办法去进行定量。
微量法检测试剂盒具备优势体现在, 其是专门针对小体积、低浓度的样品予以优化的结果。老张讲, 他后续所用试剂盒检测过体积仅5微升的样品, 并且依旧能够获取清晰的信号。这在以往是从完全不敢去设想的。
选对试剂盒，实验少走弯路
怎么判断试剂盒好不好？
老张在使用过一回之后, 便彻彻底底地变成了试剂盒的忠实使用者。然而他倒是也向我发出了提醒, 并非是所有的试剂盒都是好用的。他归纳总结出了几条用于判断的标准呢:
瞧那批次的稳定性情况, 真正称得上优质的微量法检测试剂盒, 不同批次相互之间的性能差值理应处于5%以内, 老张随后更换了一个品牌种类的试剂盒, 接连使用了三个批次, 标准曲线近乎重合。
瞅瞅操作说明书瞧瞧, 没问题的试剂盒之说明书注定是写成要特别详尽的, 从样本先前处理开始一直到读数设置这块儿, 每一个步骤都是有着明确指引的, 要是说明书说法含混模糊不清楚的话, 这样大概率产品的那品控也是处于一般状况的。
查看与之配套的标准品, 标准品所具备的稳定性以及纯度, 直接对定量结果的准确性起到决定性作用, 老张讲, 他先前使用过一个价格较为低廉的品牌, 该标准品使用了几次之后就发生了降解现象, 后来更换为大品牌的产品，此问题便再未出现过。
别让试剂成为实验的瓶颈
老张如今时常跟实验室里的新人讲, 别在小钱方面斤斤计较, 试剂可是实验的关键所在。他曾亲眼目睹一个师弟为了节省几百块钱, 始终使用自己配制的试剂, 结果连续两个月的数据全都是无效的, 最终耗费了更多金钱与时间去购置试剂盒重新开展实验。
拥有微量法检测功能的试剂盒, 尽管乍一瞧其单个售价颇高, 然而要是将因它所带来的稳定性、重复性以及节省下来的时间成本一并算进去的话, 实际上它的性价比是极为超卓的。特别是针对那些从事科研工作的人士而言, 在诸般事物当中, 时间可是比其他任何东西都要来得珍贵的。一款值得信赖的试剂盒, 能够促使你把自身的精力投放于对实验设计的思索上, 而并非费劲跟试剂进行无谓的较量。
写在最后：解决问题的捷径
老张近来的项目推进得极为顺遂，好几篇论文的数据均已整理妥当, 正准备拿去投稿。他还特地发消息告知我: “幸亏当初听从了你的提议, 置换了微量法检测试剂盒呢。不然此刻必定仍在原地徘徊不前。”。
经由此件事情, 我亦领悟了一个道理, 诸多时刻, 实验未能做出并非是你的过失, 而是工具所导致的问题。恰当的工具不但能够提升效率, 还能够使你对结果更具信心。要是你也正为检测数据不稳定、灵敏度欠缺而苦恼, 不妨试试看微量的检测试剂盒, 说不定这便是你所需的那个解决办法。
