朋友老李的转行故事
老李在前两年的时候, 从一家生物公司进行了跳槽, 自己兴办了一个小型实验室, 专门从事分子检测服务。他这个人平常话语不多, 然而做事极其认真, 属于那种“闷声干大事”的类别。在刚开始的那段时间, 他所承接的单子数量不多, 主要依靠熟人给予介绍, 日子还能够勉强维持。可是到去年下半年, 业务量忽然急剧增长, 老李自己都未曾料到, 一个电话紧接着另一个电话, 客户急切催促要结果, 他仅靠自己一个人根本就忙不过来。
检测数据的波动让他头疼
这事儿可真够棘手烦心的对老李而言, 检测结果不稳定是他最为头疼的状况。同一批样本在不同时段检测, 也就是上午进行检测和下午开展检测的情景下了, Ct值居然能够相差出两三个循环之多。客户那边急切地需要拿到报告, 身处这种状况下他却只能反复地进行复测, 所有的时间竟然全都耗费在了重复劳动之中。他跟我喝酒之时发出了叹气之声这般说道: “要是这活儿一直按照这样的状态持续干下去的话, 我迟早都是要面临赔钱这一结果了。”我随后问他究竟问题出在了什么地方, 他回答道主要原因在于试剂盒的稳定性是不行的, 不同批次的试剂盒, 其性能波动达到了太大的程度, 这才导致每次他都必须得重新去优化实验条件。
选对PCR定量试剂盒的关键在哪
试剂盒的灵敏度是不是越高越好
最初, 老李持有这样的想法, 试剂盒的灵敏度无疑是越高就越理想, 因而特意去挑选那些宣扬“超高灵敏度”的产品。然而, 在使用过后才发觉, 灵敏度高的试剂盒对于操作的要求同样很高, 只要稍微出现一点污染就比较容易产生假阳性。老李告知我: “灵敏度并非是唯一的指标, 最为关键的是稳定性以及重复性。”后续, 他在选择试剂盒的时候, 先是查看批间差, 接着再去看灵敏度, 这两者都必须要达到标准。
怎么判断试剂盒的批间稳定性
曾经之后老李变得机灵起来, 他要求厂家给出最近三个批次的试剂盒, 运用同一个质控样本各自开展三次检测, 对照 Ct 值的变动情况。要是波动处于 0.5 个循环范围之内, 则表明批间稳定性良好。他亲自尝试了五六家, 最终发觉有一个品牌的试剂盒批间差被控制在 0.3 以内, 这才安心进行批量采购。
适配不同样本类型的试剂盒怎么挑
由老李的客户送来的那些样本, 种类繁杂多样, 有血液样本, 有组织样本, 有拭子样本, 甚至包括粪便样本。以往的时候, 他运用同一款试剂盒去处理全部样本, 然而结果却是提取效率高低不等。之后呢, 他特意寻觅了一款支持多类型样本检测的PCR定量试剂盒, 其说明书当中清晰写明了适配的样本类型有哪些, 并且还附带了与之相对应针对的提取方案。老李讲道: “挑选试剂盒可不能仅仅依据参数来判断, 而是要看它能不能切实解决你手头所面临的实际问题。”。
老李亲测三款主流试剂盒的经历
老李在去年年末的时候, 做出了重新筛选试剂盒的决定。他挑选了三款在市面上口碑相对较好的，分别称作A、B、C。A牌属于进口的老品牌, 其价格昂贵不过稳定性良好；B牌是国产的新秀之选, 这价格较为便宜然而口碑存在不同看法；C牌乃是老李当下正在使用的, 价格处于适中水平, 稳定性也不错。他耗费了整整一个月的时间, 运用自己实验室的标准质控样本以及真实临床样本去进行对比测试。
A牌试剂盒的测试结果
, 那A牌确实是稳乎其中的, 其批间差是极小极小 的, 灵敏度也是颇高的。然而问题在于其价格实在是太过昂贵了, 每反应成本相较于国产的贵了将近达到三倍之多。老李进行了一番计算账目工作, 要是全部都采用A牌的话那么一个月仅仅就试剂成本这一项而言就要额外多花费两万多元。他所拥有的那个规模较小的实验室, 根本就承受不住这样的开销！
B牌试剂盒的测试结果
先看这句, B牌价格较低廉, 最最先开始的时候老李还挺心动的。但进行了两次检测之后就察觉到问题了, 低浓度那份样品的检测出比率显著地偏低, 并且出现不同批次产品之间数值波动的情况, 有时甚至能达到1个循环以上。老李表示, 虽说价格便宜, 可是所得到的数据实在没法看, 在客户那边根本交代不过去啊。
C牌试剂盒的测试结果
是老李最后选的C牌, 它价格比B牌贵那么一点儿, 却比A牌便宜好多, 最关键的是稳定性良好, 老李连续测了三个批次的试剂盒, 同一质控样本的Ct值波动小于等于0.3, 并且厂家还提供了针对不同样本类型的优化方案, 老李照着去做, 提取效率显著提高, 他跟我讲: “这东西如同找对象, 并非最贵的就佳, 适合自己才最为关键。”。
老李实验室的实操经验
实验前怎么快速验证试剂盒性能
有个习惯被老李养成了, 每一批新到的试剂盒, 都会先用三个已知浓度的质控样本做一回快速验证, 要是结果跟预期偏差处于可接受范围以内, 才再正式用于样本检测, 如此便能提前发现问题, 防止大批量样本测到一半方才发觉试剂盒存在问题。
日常操作中要注意的细节
老李归纳出了几条实操经验, 其一, 试剂盒解冻以后务必要进行混匀操作, 绝不能够直接进行离心然后就开始使用；其二, 加样之时要防止产生气泡, 不然的话就会对荧光信号的读取造成影响；其三, 每一次的实验均需要携带阴阳性对照, 哪怕仅仅只有一个样本也是要携带的。他说道: “这些细节看起来是比较简单的, 然而有很多人恰恰就是在这上面出现失误的。”。
实验室管理的小技巧
小李把试剂盒依照批号实施分开存放, 每一批试剂盒到货之后先进行记录, 标注到货的日期以及有效期。他并且专门制作了一个Excel表格, 详细记录每一批试剂盒产生的数据, 一旦察觉到某一批试剂盒存在问题, 能够在首要时间追寻到源头。他声称, “管理如果做好了, 效率自然而然就提升上去了。”。
给同行的三个实用建议
别只看品牌，要看数据
老李讲道, 好多从事做检测的友人易于遭受品牌之影响, 会认为进口的必定要比国产的要好。然而实际进行测试之后, 有些国产品牌的技术已然颇为成熟了, 其性能全然不会比进口的差, 并且价格还要便宜许多。关键之处在于你得亲自去进行测试, 凭借数据来讲明实际状况。
批量采购前先做小范围测试
别一下子采购数量众多的试剂盒, 就算价格再怎样优惠也别这么做。老李给出建议, 先购买一小批回来去做完整的测试, 在确认稳定性不存在问题之后再去考虑进行批量采购, 他曾吃过这类亏, 当初贪图便宜一次性买了一个季度所需的量, 结果使用了两批之后发现不行, 剩余的全都被浪费掉了。
关注技术支撑和售后服务
现在老李所使用的是C牌试剂盒, 该试剂盒的厂家技术员, 会每个礼拜都主动联系他, 以此来了解使用的状况, 一旦出现问题便可及时予以解决。他讲道: “具备优良售后的厂家, 着实能够为你省去大量的麻烦。那些有时只需一通电话便能够解决的问题, 要是换成别的厂家, 或许就得等待好多天。”。
