先聊聊这篇文章值不值得看
有没有碰到过这样的状况, 就是把 ELISA 试剂盒买回来了, 依照说明书一步一步地去操作, 然而得出的数据却是不正确的。多次进行重复操作, 试剂被浪费了, 时间也被耽误了, 并且还弄不清楚问题究竟出在了哪里。这篇文章所要讲述的是我朋友老张的真实经历, 他在实验室里所遭遇的挫折、摸索总结出的经验, 说不定能够帮你少走几个月的冤枉路。
老张是个什么样的人
有个叫老张的人, 他是我读研时的师兄, 他比我大三届, 如今在一家生物技术公司的研发部担任项目主管, 他负责新型诊断试剂的开发工作, 他手下管理着五六个人, 他每天都要与 ELISA 试剂盒打交道。老张有个特别之处, 那就是做事极其较真, 并且不爱说话。他属于那种发现问题后会默默想出办法去解决, 解决好了才会跟你说的那种类型。
今年三月份之际, 我们进行了一次饭约, 彼时他整个的人看上去极为疲惫。我询问究竟是怎么一回事, 他讲说最近被ELISA试剂盒弄得陷入焦头烂额的状况之中。
为什么突然就出问题了
老张他们所在的实验室, 长久以来一直使用某品牌的ELISA试剂盒来开展抗原检测工作, 在过去的两年时间里, 其表现都颇为稳定, 然而, 自去年年末起始, 各种各样的问题便接连不断地涌现出来。其中最为显著的问题便是, 标准曲线的线性状况欠佳, 重复孔之间的变异系数常常会超过15%, 甚至有些批次直接就不存在检测信号。
你可知道, 我起初的时候是认为那属于操作方面的问题。老张夹起了一块肉。老张没怎么细致咀嚼就直接吞咽下去了。老张说道 , 我让组里的每一个人都再次去参加培训一番操作的流程。这个操作流程是从加样开始一直到洗板结束。对于这样的每一步操作都进行录像而且回放。目的是查找一下其中存在的问题。如此这般折腾了差不多一个星期的时间。最终发现并非是人的问题。
第一个坑：把问题想复杂了
老张跟我讲, 那时他们怀疑仪器己损坏, 将酶标仪送去校准, 花费三千多元, 结果表明仪器全然正常。随后又怀疑稀释液或者洗涤液存在问题, 把所有试剂再次进行配制, 依旧没有效果。
老张表示, 那段日子里, 他夜里睡眠状况欠佳, 脑海中充斥着的尽是ELISA试剂盒究竟是何种情形, 他还甚至猜疑是不是实验室的温湿度存在问题, 为此特意购置了记录仪进行为期一周的测量, 结果显示温湿度的波动幅度也不算大。
恰恰在他即将要放弃之际, 一位身为做质控的老同学, 对他警示性地说了这么一句: “你有没有去思考过, 或许是试剂盒自身的某些组分现已失活了呢? ”。
第二个坑：忽略了最基础的细节
于是乎, 老张才着手开启了针对试剂盒不同组分的系统性排查工作, 他依据说明书, 将包被抗体、检测抗体、酶标抗体、标准品以及显色液这些组分逐个予以检测, 最终得出结果, 问题恰恰出在了标准品方面。
老张讲, 标准品的保存条件相当苛刻, 得在零下八十摄氏度保存才行, 然而我们实验室的冰柜老是有人去开关门, 致使温度波动幅度很大。我进行了测量, 发现有些标准品存放的地方温度竟然达到了零下四十摄氏度以上, 而且反复冻融起码有两次之多。这种状况持续了大概三个月时间, 我们才察觉到。
他们替换了全新的标准品, 在此期间规范了冰柜的管理, 作出规定其只能由指定的人进行存取操作, 并且每次开关门的时候持续的时长不能超过30秒。在进行更换之后, ELISA试剂盒的表现马上恢复至正常状态, 标准曲线的R²数值从0.88回升到了0.99以上。
第三个坑：供应商的“标准操作”不一定对
在这件事情过去以后, 老张多了个心眼, 他开始主动去跟ELISA试剂盒的供应商交流, 询问试剂盒的生产批次还有运输条件, 供应商起初态度挺好, 保证他们的产品都经过严格的质控, 然而当老张追问具体的质控数据之时, 对方言辞模糊不清。
在之后, 我做了一件事, 这件事是成为了试剂盒验收测试的执行者自身。每当有新一批次的ELISA试剂盒抵达的时候, 首先会使用拥有已知浓度的标准品去运行一回, 以此查看是不是在说明书所给出的范围当中。老张讲过, 第一批存在问题, 第二批同样存在问题, 第三批才行至正常状态。
他带着数据前往找供应商, 对方最后承认那两批产品的质控的确存在波动, 给予了他们折扣当作补偿。自那之后, 老张将试剂盒验收写入了实验室的SOP。
从“被动接锅”到“主动管控”
最近才成立试剂耗材质控小组的老张身为副组长, 所在小组的工作是制定标准, 还要监控每一批进入实验室的ELISA试剂盒的质量, 这其中包括但不限于: 检查运输温度记录, 做入厂验收, 定期抽查存储环境，并记录批间差。
老张向我发问, 询问我说的这些事是否具有难度 , 我思索一番之后进行回应, 称事情本身不存在难度, 然而却会带来烦扰 , 他露出笑容表示认同, 指出正是烦扰所在 , 但同时说道如果不去做那些会带来烦扰的事情 , 后续便会遭遇更为烦扰的状况。
省下来的时间和钱
老张进行了一次算账, 算出: 去年曾因ELISA试剂盒质量方面的问题, 致使出现重复实验的情况, 进而大概浪费了200多个小时的工时, 还消耗了价值约三万元的试剂。今年当质控开展起来以后, 这种浪费降低到了几乎为零的程度。
那么你猜猜看最具价值的究竟是什么呢 老张悄声说道 是组员们不会再因重复进行实验而产生烦躁情绪了 实验室的整体氛围已然改善了许多 大家的工作效率也随之得到了提升。
总结一下老张的经验
不要一开始就朝着复杂的方向去思考, ELISA试剂盒出现的问题, 在许多时候是由简单原因致使的, 像存储条件、保存温度、反复冻融这些基础方面的细节, 第二, 不要全然相信供应商所说的“没问题”, 依靠自己动手去做验收, 凭借数据来表明情况, 这才是最为可靠的, 第三, 要将质控流程制定成制度, 老张如今经常提及的一句话是: “你没办法对所有变量实施控制, 然而你能够把控你最为在意的那几个。”。
最后说一句
若你同样正与ELISA试剂盒有所关联, 不妨先行查验一下实验室中极易被忽视的方面。别急着去更换品牌, 别急着去更改方法, 先将基础工作切实做好。老张所能达成的, 你同样能够达成。
