如何选择合适试剂盒

倘若面对市场里那一堆五花八门的PCR扩增试剂盒，那么首先就要确切地弄清楚自身的实验需求。不同的试剂盒针对的模板类型存在颇为显著的差异，比如说普通DNA模板、高GC含量模板或复杂结构模板均有专门的配方。建议先去查看产品说明书中标明的适用样本范围，而后再去对比自身样本的特性，以免因为匹配不合适而致使扩增失败。

扩增效率怎样提高

使扩增效率得以提升的关键之处在于酶活性以及反应体系所进行的优化，优质的PCR扩增试剂盒会给出高保真DNA聚合酶以及经优化的缓冲液，这能够有效地减少非特异性条带，在实际加以使用的时候，要严格依照说明书所推荐的退火温度以及延伸时间来开展操作，与此同时要留意避免试剂出现反复冻融的情况，每次取用之后要马上放回至-20℃进行保存，如此方可最大限度地保持酶活效率。

结果重复性如何保证

想要保证结果具有重复性，得从两方面着手，一方面是操作规范性，另一方面是试剂批次稳定性。建议优先去选择那种经过批次验证的PCR扩增试剂盒，并且要记录每一批试剂的CT值波动范围。与此同时，在进行加样过程的时候，使用带滤芯吸头以此来防止气溶胶污染，针对每个样本设置三个复孔，借助计算变异系数来评估重复性是不是在可接受区间之内。

储存运输注意事项

PCR扩增试剂盒因对温度具有敏感性，所以运输以及储存环节会直接对试剂性能产生影响，先检查收货时冰袋是不是没有完全融化，试剂管有没有破损，长期储存得放置于-20℃恒温冰箱，防止温度出现波动，短期使用能够暂存于4℃，不过不应超过一周，分装操作可减少反复冻融造成的损伤，每次仅取出需要的量，剩余部分马上回冻。