稳定性差的紫外试剂盒，被老张用一招搞定

上个月，于济南高新区，于一家生物检测实验室里，老张那般性情急烈之人，几乎要被一个名为“紫外法生化试剂盒”的物品急得忍不住骂娘了。

有个叫老张的朋友，我是在行业交流会上结识他的，这老张从事试剂研发岗位长达七年之久，现阶段担任着一家第三方检测机构的技术负责人一职，在他负责的相应项目范围之内，针对生化指标展开的检测量是最为庞大的，每一天要运作几十个样本，等整个流程结束之后，试剂的消耗情况如同流水一般持续不断。

他往昔始终采用传统的可见光比色法的试剂盒，其操作极为繁杂，干扰众多，并且结果还不稳定。去年年末的时候，他听闻同行提及紫外法生化试剂盒有灵敏度颇高、线性范围宽广的特性，于是便兴致勃勃地更换了一批。然而使用还未满半个月，问题便出现了。

用紫外法试剂盒总是测不准怎么办

老张那天下午给我打电话，语气里全是火气。

有着同样的样本，于上午对其进行测量，在下午再次对其展开测量，最终所呈现的结果竟然相差了百分之二十。你说说这般情况让我究竟该以怎样的方式去跟客户提交报告呢？

他讲，试剂盒说明书当中写明稳定性良好，然而实际运用时，每次开启机器都必须重新进行校准，标准曲线也老是出现变化。他们实验室里几个技术员轮流开展操作，每一个人做出来的结果都并非十分相同。

我问他：“你用的紫外法试剂盒，配套的仪器条件调过没有？”

他当时愣了一下，随后表示并没有太在意这个情况，只是单纯觉得试剂盒属于标准品，所以直接拿去上机就可以了。

这儿便是问题所在之处。紫外法对于波长的准确程度、光路的洁净状况、反应的温度条件均极为敏感。仅仅一味地关注着试剂盒自身，却忘却了仪器同样需要跟上进度，这乃是诸多实验室陷入困境的所在之地。

老张后来静下心，把整个流程捋了一遍。

他察觉到，他们实验室所使用的紫外法试剂盒，其说明书之中写明的是“直接加样”，然而样本的浓度呈现出极大的波动情况。对于高浓度样本而言，倘若不进行稀释便直接上机，那么反应体系里的底物会出现过快消耗情况，进而致使反应无法完全进行，最终结果自然而然就会偏低。

低浓度的样本，加样量过少以致吸光度变化很微弱，仪器自身的噪声将信号给淹没掉了。

“你这不是试剂盒的问题，是样本前处理没跟上。”我跟他说。

老张这才察觉到，紫外法生化试剂盒虽说灵敏度颇高，然而同样势必需要依据样本浓度灵活可变地去调整稀释倍数。他再度制定了操作规范，每个样本来临之前先行开展预稀释梯度测试，确定最为适宜的加样量。

结果出来后，重复性从原来的百分之十几降到了百分之三以内。

解决了操作问题，老张以为万事大吉了。可到了月底，又出事了。

此次是试剂盒自身出现了问题，有一批新近抵达的、采用紫外法的生化试剂盒，开箱以后按照说明书提出的要求，在二至八摄氏度的环境下进行冷藏保存，然而使用了三天。试剂的颜色就发生了变深的状况，反应曲线也呈现出不对劲的情形。

老张经过一番冷链记录的查看以后才知晓，这批做实验用的试剂在通过物流运输的过程当中，有一段时期的温度记录呈现出超过了15度的情况，这种超越的状态持续了四个小时。

我提醒他，紫外法试剂盒当中的某些成分，对于温度格外敏感，特别是NADH、NADPH这些辅酶，一旦温度升高，降解速度就会变快，快到明显的程度。

老张赶忙联系供应商，更换了一趟冷链运输的货物，并且要求实验室里，任何一个试剂盒在开箱之后，都要进行一次质控品验证，在确认没有问题之后方可使用。

从那以后，他的实验室再没因为试剂保存问题出过岔子。

今年三月份的时候，我带着老张去参与了一场生化检测技术沙龙。在那个台上，有一位资深专家讲述了一个案例：某个实验室运用紫外法来测定乳酸脱氢酶，一直都没办法做出标准曲线，折腾了长达两个月的时间，最终才发现原来是波长设置错误了。

紫外法试剂盒进行测定时，其波长通常处于340纳米的大致范围，不过不同厂家生产的，并且针对不同指标的此类试剂盒，会存在细微差别。要是仪器的波长没有经过校准，又或者是操作员依据自身经验选用了其他波长，那么最终得出的结果，偏差将会极大。

张氏听到之后立即拿出手机，朝着实验室拨打电话，要求他们将全部紫外分光光度计的波长再次校准一回。

回来以后，他向我发出感慨，说道：“先前认为生化试剂盒不过是个傻瓜式的工具，只要进行加样操作，再去进行读数，然后就可以得出结果。然而如今才明白，像紫外法这样的技术，其细节丰富到能够写出一本书来。”。

他特意组织了一回内部培训，将波长校准环节过了一遍，又把温度控制环节过了一遍，还把样本稀释环节过了一遍，再把冷链保存环节过了一遍。培训结束之后，实验室里每个人都会背诵“紫外四要素”。

上一周，我再度去往老张所处的实验室了，其时，他正端坐在电脑跟前，看着那份报告，其脸上已没了几个月之前所呈现出的焦虑神情。

他向我展示了最近一个季度的数据，其中紫外法生化试剂盒的检测重复性稳定状况处于百分之二以内，和第三方比对所获结果的一致性达成百分之九十八以上，客户投诉率从百分之五降低至接近零。

老张笑着说道，以前他觉得试剂盒不太好用，然而现如今他发现原来是自己没有完全摸透它的脾性。

他所拥有的经验实则仅有一条，那便是紫外法生化试剂盒属于一种良好的工具，然而它针对操作细节所提出的要求显著高于传统方法，仪器需要进行校准，样本需要实施预处理，保存必须严加要求，波长需要予以确认，这些环节紧密相连，缺少任何一环都是不可以的。

老张目前已然成为了他们那个公司内部的技术顾问，专门去协助别的实验室对紫外法试剂盒的使用流程予以优化，他时常会讲出这样一句话：“ 在着急怪罪试剂盒之前，先瞧瞧自己是不是把它照料妥善了。 ”。

这话糙，但理不糙。