去年冬季时节, 我的老友老赵险些被一个细胞供应商害得很惨, 老赵是我于生物技术领域结识将近十年的兄弟, 老赵于上海张江自行开办了一家规模较小的药物筛选外包服务公司, 此公司专门从事眼科药物的早期毒性评估工作, 他的那家公司规模不大, 然而实验室的设备却颇为齐全, 在前年的时候刚刚购置了一台高端的活细胞成像系统, 这台系统专门用以开展兔原代角膜上皮细胞的药物渗透实验。

话说这事儿得追溯到去年10月, 那时候, 老赵接到了一个订单, 此订单来自苏州的一家创新药企, 要对一款针对干眼症的新化合物进行测试, 在测试过程中需要使用兔原代角膜上皮细胞去做屏障功能实验。当时, 老赵自己手里所拥有的细胞库存数量不足, 于是他赶忙联系了以前曾经合作过的一家提供细胞的供应商。此供应商给出的报价较为便宜, 还声称这些细胞是从新西兰兔身上分离出来的, 其纯度能够达到95%, 老赵当时没做过多思考就下了订单。

细胞到手之后, 老赵即刻察觉到异样。他在前年于实验室曾繁育过一批兔原代角膜上皮细胞, 清楚知晓正常情形下应呈现何种形态, 那是如鹅卵石般的圆形, 铺满后能够形成致密的单层。然而此次所收到的细胞, 在镜下观察形态显著不同, 部分细胞长得类似梭形, 并且存在一些漂浮着的死细胞。老赵赶忙进行了免疫荧光染色, 结果显示CK12角蛋白阳性率仅为50%多, 这表明这批细胞中混入了大量成纤维细胞以及其他杂细胞。

那几日, 老赵着急得嘴上起了泡, 订单交期仅剩下两周时间, 重新订购细胞起码得等五至七天, 并且倘若再买到不可靠的货物, 整个项目便会失败, 他后来跟我讲, 那段日子他每晚都失眠, 反复在电脑上查阅兔原代细胞的供应商资料, 查看了不少于二十家公司的产品说明书以及质检报告。

是在11月5号出现了转折点, 有老赵, 他在行业微信群当中, 看到有一个同行进行推荐, 说存在一家做兔原代细胞的供应商, 其每一批细胞都附带第三方检测的流式细胞图, 并且作出承诺, 将会在发货前24小时拍一张显微镜下的活细胞照片发送给客户来确认, 老赵怀着试试看的心态添加了他们的销售微信, 对方迅速发来一份详细的质检报告, 其中涵盖兔原代角膜上皮细胞的CK12和p63双标染色结果, 还有跨膜电阻的检测数据。

跟我讲的老赵, 提及他实际最为看重的那一点, 是兔原代细胞是不是存在完备的质检体系。之后他向我详细解说了三条硬性标准,直至如今我都能清晰地记着。

兔原代细胞如何判断纯度够不够

第一首先是纯度验证, 老赵往昔曾踩过坑, 知晓一些供应商取传代细胞或者混合细胞来充数, 他告知我, 真正的兔原代细胞需有明确的标志物鉴定, 像角膜上皮细胞要查看CK12及CK3的表达, 视网膜色素上皮细胞要查看RPE65和CRALBP, 要是视网膜神经节细胞, 那就得看Brn3a阳性率, 他讲当下行业内较为认可的做法是流式细胞术加免疫荧光双标, 两个结果能契合才算可以。

兔原代细胞活率达不到实验要求怎么办

第二点关乎活率情况, 老赵讲那次他所购得的细胞, 进行台盼蓝染色查看, 其活率仅为86% , 他告知我, 真正可用于做实验的兔原代细胞, 活率起码要90%以上, 最佳是95%以上。那个可靠的供应商于电话里直接向他展示了过去三个月的质检记录, 每批细胞的活率皆稳定处于94%至97%之间, 并且每批都附带了台盼蓝染色的显微镜照片以及Countess细胞计数仪的结果截图。老赵当时便称, 这份具备透明化特质的质检数据, 比任何口头承诺都更具说服力。

兔原代细胞运输中会影响功能吗

关键意义更为突出的第三点是, 运输以及时效方面。老赵过后跟我讲述, 兔原代细胞与细胞系有所不同, 其格外娇弱, 从分离直至接种的时间范围极为短暂。那家具备可靠性的供应商所采用的是专门用于细胞运输的培养基, 并且添加了抗氧化剂以及营养补充剂, 发货之际运用双层保温箱附加冰袋, 确保在48小时之内实现送达。老赵从苏州订购的那一批货物, 从下达订单开始直至细胞抵达实验室, 总共计时仅仅使用了26个小时, 开启箱子时细胞培养基的颜色仍旧呈现为正常的粉红色, pH值不存在问题。

老赵运用这批兔原代角膜上皮细胞开展了, 完整的屏障功能实验, 他告知我, 细胞被接种到Transwell小室后, 第三天跨膜电阻稳定在了800 Ω·cm² 以上, 相较于之前那批杂细胞, 强出了不止一个量级, 最终实验数据极为出色, 那家苏州药企的制剂部门主管亲自致电过来夸赞他数据坚实。

如今, 老赵所在的公司已然成为了那家供应兔原代细胞的供应商的经时长年合作的客户, 他每一次进行货物采购的时候, 都会预先查看一番对方给出的批次质量检验报告, 如此心里才会觉得安稳踏实。上个月, 我们一同共进餐食, 他仍旧有所感触地讲, 挑选兔原代细胞供应商这件事情, 就如同找寻相亲对象一般, 外型看上去大致相近的, 其内在的差别可就大得没边了。